玫瑰乙醇提取物通过抑制炎症及修复皮肤屏障改善DNCB诱导的耳水肿机制研究

本研究揭示了50%乙醇提取的玫瑰（RT50）在体内外模型中展现的抗炎与皮肤屏障修复双重功效。通过HaCaT细胞实验和DNCB诱导的小鼠耳水肿模型，证实RT50能显著降低TNF-α/IFN-γ刺激的促炎因子（IL-1β/IL-6/IL-8）及趋化因子CCL17表达，并恢复皮肤屏障蛋白（FLG/IVL/LOR）和紧密连接组分（CLDN/OCLN/TJP1）。研究为特应性皮炎（AD）和接触性皮炎（CD）提供了天然干预策略，其抑制STAT3/STAT6通路和降低IgE/IgG的机制具有重要转化价值。

　　

1 引言

玫瑰（Rosa rugosa Thunb.）作为传统药用植物，富含黄酮类（槲皮素/异槲皮素）和水解单宁（如rugosin），既往研究证实其具有抗炎、抗氧化及抗过敏活性。本研究聚焦其50%乙醇提取物（RT50）对皮肤炎症的干预作用，针对特应性皮炎（AD）和接触性皮炎（CD）这两种以皮肤屏障破坏和Th2型免疫反应为特征的疾病展开探索。

2 材料与方法

2.1 RT50制备

3 kg干燥玫瑰花瓣经50%乙醇70°C提取5小时，浓缩后获得粉棕色提取物。

2.2 细胞实验

HaCaT角质形成细胞经TNF-α/IFN-γ（TI，各50 ng/mL）刺激建立炎症模型，RT50预处理1小时后，通过ELISA检测IL-1β/IL-6/IL-8/TNF-α及CCL17分泌量，qPCR分析基因表达。

2.5 动物模型

BALB/c小鼠经2%DNCB致敏后，以1%DNCB每周2次激发耳水肿，同时口服RT50（50/100/200 mg/kg）或地塞米松（DX，1 mg/kg）干预4周。取耳组织进行H&E和甲苯胺蓝染色，评估表皮/真皮厚度及肥大细胞浸润，血清检测IgE/IgG1/IgG2a水平。

3 结果与讨论

3.1 RT50的抗炎机制

在HaCaT细胞中，RT50（10-60 μg/mL）剂量依赖性地抑制TI诱导的IL-6基因表达（下降42%-68%）和蛋白分泌（p<0.01），同时显著降低CCL17（胸腺基质淋巴细胞生成素诱导因子）水平。该效应可能与抑制STAT3磷酸化相关。

3.2 耳水肿改善

DNCB使小鼠耳部表皮增厚3.2倍，而RT200组厚度恢复至正常组1.5倍（p<0.01）。肥大细胞浸润数从DNCB组的28.4±3.1个/视野降至RT200组的9.7±1.8个（p<0.01），血清IgE水平降低57%。

3.4 屏障功能修复

RT50上调DNCB抑制的皮肤屏障蛋白：丝聚蛋白（FLG）表达提升2.1倍，兜甲蛋白（LOR）和包壳蛋白（IVL）分别增加1.8倍和1.5倍（p<0.05）。紧密连接蛋白claudin-1和occludin的mRNA水平也显著恢复，提示RT50通过多靶点修复皮肤物理屏障和免疫屏障。

4 结论

RT50通过双重机制缓解皮肤炎症：一方面抑制STAT3/STAT6通路减少Th2型细胞因子（IL-4/IL-13）产生，另一方面上调FLG/IVL/LOR等屏障蛋白表达。该研究为开发玫瑰源性天然药物用于AD/CD治疗提供了实验依据，其50%乙醇提取工艺在保证功效的同时降低了细胞毒性（100 μg/mL才显现毒性），具有较好的转化前景。