新型LRRC15抑制剂Brevilin A通过抑制LRRC15/STAT3信号通路发挥强效抗类风湿性关节炎作用

针对类风湿性关节炎(RA)现有治疗药物副作用大、疗效有限的问题，研究人员发现中药鹅不食草活性成分Brevilin A(BrA)可通过靶向抑制LRRC15/STAT3信号通路，显著改善胶原诱导关节炎(CIA)大鼠关节肿胀和软骨损伤，并抑制RA成纤维样滑膜细胞(RA-FLSs)的增殖迁移。该研究为开发新型靶向治疗药物提供了重要依据。

　　

类风湿性关节炎(RA)作为一种慢性自身免疫性疾病，全球患病率约1%，其特征性病理改变包括滑膜炎、血管翳形成、软骨破坏和骨侵蚀。目前临床常用药物如改善病情抗风湿药(DMARDs)虽能缓解症状，但存在肝肾功能损伤等副作用，且难以完全阻断疾病进展。尤其值得关注的是，活化的成纤维样滑膜细胞(FLSs)在RA发展中扮演关键角色——这些细胞不仅具有肿瘤样侵袭特性，还能分泌基质金属蛋白酶(MMPs)和促炎因子，加速关节破坏。近年来，富含亮氨酸重复序列蛋白15(LRRC15)在肿瘤微环境中的促转移作用被广泛报道，但其在RA中的作用机制尚属空白。与此同时，传统中药鹅不食草(Centipeda minima)的活性成分Brevilin A(BrA)虽被发现具有抗炎、抗肿瘤等多重药理活性，其抗RA效应及机制仍有待阐明。

为回答这些问题，Qiao Zhiping等研究人员在《Arthritis Research》发表论文，通过生物信息学分析发现LRRC15在RA患者滑膜组织中显著高表达。研究团队构建了脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞模型、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)刺激的RA-FLSs模型以及胶原诱导关节炎(CIA)大鼠模型，结合基因沉默和过表达技术，系统评估了BrA的抗RA效果及其作用机制。

主要技术方法包括：1）从广州 Jennio公司获取人源RA-FLSs和中科院细胞库获取RAW264.7细胞建立体外模型；2）采用MTT法检测细胞活力，EdU染色分析增殖，伤口愈合实验评估迁移能力；3）通过Western blot和RT-qPCR检测LRRC15/STAT3通路相关蛋白表达；4）建立CIA大鼠模型，采用X射线和显微CT评估关节损伤，H&E染色进行组织学评分。

研究结果部分：

1. 1.

   LRRC15参与RA-FLSs增殖迁移

   通过分析GEO数据库中RA患者RNA-seq数据，发现LRRC15在滑膜组织显著上调。实验证实敲低LRRC15可抑制TNF-α诱导的RA-FLSs粘附、增殖和迁移，而过表达LRRC15则增加MMP2/9等转移标志物的表达。

2. 2.

   BrA在体外发挥抗炎作用

   1-4 μM BrA能剂量依赖性抑制LPS诱导的RAW264.7细胞一氧化氮(NO)和炎症因子(IL-1β、TNF-α)释放，同时下调诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和环氧合酶-2(COX-2)表达。在TNF-α刺激的RA-FLSs中，BrA同样表现出显著抗炎效果。

3. 3.

   BrA抑制RA-FLSs恶性生物学行为

   BrA处理可显著抑制TNF-α增强的RA-FLSs增殖（EdU实验），降低MMP2/9蛋白水平，并有效减弱细胞粘附和迁移能力（伤口愈合实验）。

4. 4.

   BrA改善CIA大鼠关节炎症状

   动物实验显示，1.5-3 mg/kg BrA腹腔注射能显著减轻CIA大鼠足爪肿胀和关节炎评分。影像学和组织学分析证实，BrA治疗组关节炎症浸润和骨侵蚀明显改善，效果与阳性对照药吲哚美辛相当。

5. 5.

   LRRC15/STAT3通路机制验证

   分子机制研究表明，BrA能下调TNF-α诱导的RA-FLSs中LRRC15表达，并抑制STAT3酪氨酸705位点磷酸化(p-STAT3^Tyr705)，但不影响总STAT3水平。免疫组化进一步证实BrA可降低滑膜组织LRRC15和p-STAT3表达。

结论与讨论部分：

该研究首次揭示LRRC15通过激活STAT3信号通路促进RA-FLSs恶性表型，而传统中药活性成分BrA能特异性靶向该通路发挥治疗作用。从转化医学角度看，这一发现具有双重意义：一方面为RA治疗提供了新型LRRC15靶向抑制剂，BrA因其天然来源特性可能具有更好的安全性；另一方面，LRRC15/STAT3轴作为RA治疗新靶点的确立，为开发其他靶向药物提供了理论依据。值得注意的是，研究团队采用的"生物信息学预测-体外验证-动物模型评价"研究策略，为中药活性成分的现代化研究提供了范本。未来需要进一步开展BrA的临床前药代动力学研究，并探索其与其他抗RA药物的联合应用潜力。