基于狂犬病毒载体的H5N1高致病性禽流感灭活疫苗在牛体内的免疫原性与安全性研究

为解决高致病性H5N1禽流感病毒（HPAI H5N1）在牛群及其他哺乳动物中的传播威胁，研究人员开发了基于狂犬病毒（RABV）载体的灭活疫苗RABV-H5。该疫苗通过表达H5血凝素（HA）抗原，在牛体内诱导出针对clade 1和clade 2.3.4.4b病毒的中和抗体，效价与自然感染康复牛相当，且免疫应答可持续200天以上。研究为防控H5N1跨物种传播提供了安全有效的疫苗策略，发表于《npj Vaccines》。

　　

研究背景与问题

2024年初，高致病性H5N1禽流感病毒（clade 2.3.4.4b）在美国德州奶牛中暴发，导致产奶量骤降和跨物种传播风险激增。该病毒已蔓延至16个州的900多个农场，并感染包括海豹、狐狸等67种哺乳动物，人类感染病例达67例。传统生物安全措施难以遏制疫情，亟需开发针对牛群的H5N1疫苗。

研究设计与方法

研究团队利用狂犬病毒疫苗载体BNSP333，插入优化后的H5基因（源自clade 1毒株A/Viet Nam/1203/2004），构建灭活疫苗RABV-H5。通过12头小母牛分组实验（单次/加强免疫、含/不含SEPPIC-SWE^TM佐剂），评估血清中和抗体（VNA）效价。关键技术包括：

1. 1.

   假病毒中和试验（VSVΔG-H5-GFP）

2. 2.

   重组流感病毒PR8-H5N1中和试验

3. 3.

   狂犬病毒快速荧光聚焦抑制试验（RFFIT）

4. 4.

   美国农业部（USDA）批准的牛血清样本分析

研究结果

H5免疫原性验证

• •

  疫苗设计：RABV-H5成功表达H5和狂犬病毒G蛋白（图1B），电泳与Western blot证实病毒颗粒完整性（图1C-D）。

• •

  中和抗体应答：佐剂组单次免疫14天即产生VNA，加强免疫后效价显著提升（图1H）。疫苗对clade 1和clade 2.3.4.4b毒株的中和效价无显著差异（图1L），显示交叉保护潜力。

狂犬病毒载体双重保护

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  所有佐剂组牛血清狂犬病毒中和抗体（RFFIT）均超过WHO保护阈值（0.5 IU/mL）（图2A-C）。

• •

  预存RABV免疫力不影响H5免疫应答（图2F-G），且加强免疫可同时提升两种病毒的抗体水平。

安全性评估

血液生化与血常规指标均正常，佐剂SEPPIC-SWE^TM未引发不良反应。

结论与意义

研究首次证明RABV载体疫苗可诱导牛体对H5N1的持久中和抗体，效价与自然感染康复牛相当。其双重保护特性（抗H5N1+狂犬病）尤其适用于狂犬病流行地区，符合“One Health”理念。局限性包括未进行攻毒实验和仅使用肉牛模型，但结果为防控H5N1跨物种传播提供了关键工具。论文由Nir Paran、Matthias J. Schnell等团队完成，发表于《npj Vaccines》。