盐酸石蒜碱通过早期激活p38 MAPK信号通路显著抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒在原代及传代细胞中的增殖

这篇研究首次揭示了盐酸石蒜碱（LH）通过早期激活p38 MAPK/NLRP3/Caspase-1/IL-1β通路，显著抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）在Marc-145细胞和原代猪肺泡巨噬细胞（PAMs）中的复制（EC50<1?μM），为开发新型抗PRRSV药物提供了潜在靶点。

　　

引言

猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）是危害全球养猪业的重大病原体，其疫苗保护效果有限且缺乏特效药物。本研究聚焦天然生物碱盐酸石蒜碱（LH）的抗PRRSV潜力，揭示了其通过独特机制调控宿主p38 MAPK通路抑制病毒复制。

材料与方法

实验采用PRRSV GD-HD、CH-1a和NADC30-like毒株感染Marc-145细胞和原代PAMs，通过MTT法测定LH的半数细胞毒性浓度（CC₅₀），结合免疫荧光（IFA）、qRT-PCR和Western blot分析抗病毒效果。时间进程实验动态监测p38磷酸化（p-p38）及下游炎症因子表达。

结果

LH的强效抗PRRSV活性

LH对Marc-145细胞的CC₅₀为32.54?μM，而对PRRSV三种毒株的EC₅₀仅0.43-0.67?μM（选择性指数>48）。在PAMs中，LH（1?μM）使病毒滴度降低7.2个对数级，且抑制作用呈现剂量和时间依赖性。

作用机制：早期激活p38 MAPK通路

区别于PRRSV感染晚期（24 hpi）才诱导p-p38的特点，LH处理1小时内即显著提升p-p38水平，持续至36 hpi。siRNA敲低p38部分逆转LH的抗病毒效果，而过表达p38则增强其作用，证实p38激活是LH抗PRRSV的核心机制。

下游炎症通路调控

LH通过p38上调NLRP3和Caspase-1表达，促进pro-IL-1β转化为成熟IL-1β。外源添加IL-1β（0.01-1?μg/mL）可模拟LH的抗病毒效果，直接抑制PRRSV RNA和蛋白合成。

讨论

本研究首次阐明LH通过"抢先激活"宿主p38 MAPK通路，打破PRRSV延迟免疫逃逸的策略。相较于传统p38抑制剂在抗病毒中的应用，LH的创新性在于利用宿主固有免疫通路（如NLRP3/IL-1β）对抗病毒。其低细胞毒性和已有药代动力学数据（小鼠LD₅₀ 112.2 mg/kg）支持其临床转化潜力。

展望

未来需在猪模型中验证LH的体内效果，并探索其与现有抗病毒药的协同作用。该研究为宿主靶向抗病毒药物开发提供了新范式——通过调控天然免疫时序性激活对抗病毒逃逸。