EGFR/SORT1轴调控胶质母细胞瘤血管生成拟态及肿瘤干细胞特性的分子机制研究

本研究针对胶质母细胞瘤(GBM)治疗中血管生成拟态(VM)和肿瘤干细胞(CSC)介导的耐药难题，通过揭示EGFR/SORT1互作调控VM形成的分子机制，发现SORT1沉默可显著抑制EGFR表达并降低ABC转运体(ABCB1/ABCB5)和干细胞标志物(PROM1/CD133、SOX2)水平。该研究为靶向EGFR/SORT1复合物克服GBM治疗抵抗提供了新策略，具有重要临床转化价值。

　　

胶质母细胞瘤(GBM)作为最具侵袭性的原发性脑肿瘤，患者中位生存期仅12-15个月，其治疗面临三大难题：肿瘤异质性、治疗抵抗和不可避免的复发。其中，血管生成拟态(Vasculogenic Mimicry, VM)作为内皮非依赖性的血管化方式，与肿瘤干细胞(Cancer Stem Cells, CSC)特性及化疗耐药密切相关。表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor, EGFR)作为GBM关键驱动因子，其异常激活与VM形成相关，但具体调控机制尚不明确。近年研究发现，分拣蛋白(Sortilin, SORT1)作为膜蛋白分选受体，在多种癌症中异常高表达，并能与EGFR发生互作。Marie-Eve Roy团队由此提出科学假设：EGFR/SORT1轴是否通过调控VM影响GBM恶性进展？

研究团队整合生物信息学分析、分子生物学和功能实验等多学科方法。通过TCGA数据库分析GBM组织转录谱；采用U87/U251等GBM细胞系进行三维VM模型培养；运用xCELLigence系统实时监测细胞迁移；通过siRNA基因沉默和抑制剂AF38469干预SORT1功能；结合PCR阵列分析化疗耐药和CSC相关84个基因表达谱。

Increased gene expression of EGFR and tetraspanins markers CD9, CD63 and CD81 in glioblastoma tumor tissues

生物信息学分析显示，与正常脑组织相比，GBM组织中EGFR和外泌体标志物CD9/CD63/CD81显著上调。蛋白互作网络证实EGFR是连接SORT1与外泌体生物标志物的关键节点。

SORT1 expression is upregulated in grade IV glioma cell lines and tumor tissues

在U87/U118/U251等IV级胶质瘤细胞中，SORT1在mRNA和蛋白水平均高表达。临床样本分析显示SORT1在III-IV期肿瘤中的表达显著高于I-II期。

In vitro vasculogenic mimicry of glioblastoma cells

成功建立GBM细胞三维VM模型，定量分析显示U87细胞在Cultrex基质上能形成典型管状结构，且管长、分支点等参数随时间递增。

Silencing of SORT1 disrupts VM in glioblastoma cells

siRNA沉默SORT1可剂量依赖性抑制VM形成，同时降低EGFR蛋白表达。免疫印迹证实抗SORT1胞外域(ECD)和胞内域(ICD)抗体均检测到SORT1表达下降。

Pharmacological inhibition of SORT1 reduces glioblastoma cell migration

SORT1抑制剂AF38469以浓度依赖方式抑制细胞迁移(IC₅₀=0.32-1.75 μM)，基因沉默实验进一步验证SORT1对迁移的调控作用。

Impact of SORT1 and EGFR gene silencing upon the transcriptomic drug resistance and cancer stem cells signature of VM

PCR阵列分析发现，沉默SORT1或EGFR均能显著下调ABCB1/ABCB5等耐药基因和PROM1/CD133/SOX2等CSC标志物，提示二者共同调控VM相关转录重编程。

该研究首次阐明SORT1通过调控EGFR表达影响GBM的VM能力，并揭示其对化疗耐药和CSC特性的协同调控作用。从转化医学角度看，靶向SORT1/EGFR复合物可同时阻断VM形成、细胞迁移和干细胞特性，为克服GBM治疗抵抗提供新思路。研究局限性在于尚未进行体内实验验证，未来需在PDX模型等体系中进一步确认治疗潜力。论文发表于《BMC Cancer》为GBM精准治疗策略开发奠定了重要理论基础。