ITK通过TCR-Ca2+-Calcineurin-NFAT-IFN-γ通路增强T细胞对弥漫大B细胞淋巴瘤的杀伤作用及与利妥昔单抗的协同效应研究

本研究针对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)治疗中T细胞功能耗竭和耐药性问题，通过生物信息学分析和功能实验揭示了IL-2诱导T细胞激酶(ITK)通过TCR-Ca2+-Calcineurin-NFAT信号通路增强CD8+T细胞抗肿瘤活性的分子机制，并发现ITK过表达与利妥昔单抗具有显著协同效应，为DLBCL免疫联合治疗提供了新靶点。

　　

弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)作为非霍奇金淋巴瘤(NHL)中最具侵袭性的亚型，尽管R-CHOP方案显著改善了患者生存，但仍有30-40%患者面临耐药和复发困境。肿瘤微环境(TME)中T细胞功能耗竭是治疗失败的核心因素，而CAR-T等免疫疗法又受限于T细胞衰竭和抗原逃逸。这一临床困境呼唤着对T细胞激活机制的新探索。

最新发表在《Scientific Reports》的研究聚焦TCR信号通路关键分子ITK的调控作用。研究团队通过GEO数据库挖掘发现ITK在DLBCL中低表达且与不良预后相关，进而利用小鼠T细胞系CTLL-2构建ITK过表达模型，结合钙成像、酶活性检测、免疫荧光等技术，系统解析了ITK通过增强钙信号-Calcineurin-NFAT通路促进IFN-γ分泌的分子机制。临床样本分析显示ITK模块评分可独立预测患者生存，实验证实ITK过表达T细胞与利妥昔单抗联用可使IC₅₀降低至53.53μg/mL。

生物信息学分析揭示ITK的临床相关性

通过GSE32018数据集比较DLBCL与正常淋巴结组织，鉴定出ITK显著低表达且与PD-L1呈负相关。TIMER分析显示ITK表达与CD8⁺T细胞浸润正相关，Kaplan-Meier证实高ITK表达患者接受免疫检查点抑制剂治疗后生存更优。

ITK网络模块构建与功能解析

从CellNetdb获取的CD8⁺T细胞特异性ITK网络模块包含41个基因，富集于T细胞激活和PD-1/PD-L1通路。GSVA计算的模块评分在172例DLBCL患者中显示，低评分组3年生存率显著降低(HR=0.374)，且与免疫治疗响应正相关。

ITK增强T细胞功能的机制验证

在CTLL-2细胞中，ITK过表达使TNF-α mRNA水平提升2.1倍，钙离子峰值强度增加68%。Calcineurin活性检测显示酶反应速率提高1.8倍，免疫荧光证实NFAT核转位效率提升。ELISA检测IFN-γ分泌量增加3.2倍，CCK-8显示增殖能力增强。

协同治疗效果的实验证据

在A20淋巴瘤细胞共培养模型中，ITK过表达CTLL-2使肿瘤细胞存活率降低至41%，凋亡率增加2.3倍。与利妥昔单抗联用后，IC₅₀从179.8μg/mL降至53.53μg/mL，呈现显著协同效应。

该研究首次阐明ITK通过"TCR-Ca²⁺-Calcineurin-NFAT-IFN-γ"轴重塑T细胞功能的完整机制，不仅为DLBCL免疫治疗提供了新靶点，更开创性地证实ITK激活可增强传统化疗药物敏感性。这种"免疫调节+靶向治疗"的双轨策略，为克服R-CHOP耐药性提供了具临床转化价值的解决方案。来自河南省人民医院的研究团队通过多组学分析和功能实验的有机整合，为肿瘤微环境重编程研究树立了范式。