综述：EMQN实体瘤微卫星不稳定性分析与报告的最佳实践指南

这篇综述由国际专家工作组制定，系统阐述了微卫星不稳定性(MSI)检测在实体瘤诊疗中的关键作用。文章提供了15项权威建议，涵盖MSI检测技术规范(如必须使用单核苷酸重复标记)和临床解读要点(涉及林奇综合征筛查和免疫检查点抑制剂治疗)，为分子诊断实验室提供了标准化操作框架。

　　

引言

DNA错配修复(MMR)系统通过识别修复DNA复制错误维持基因组稳定性，其核心由MLH1、MSH2、MSH6和PMS₂蛋白组成。当MMR功能缺失(dMMR)时，微卫星序列(1-9个核苷酸重复单元)的插入/缺失变异率激增100-1000倍，形成微卫星不稳定性高(MSI-H)表型。这一现象在结直肠癌(14%)和子宫内膜癌(27%)中尤为显著，既是林奇综合征(LS)的生物标志物，也预示免疫检查点抑制剂(ICI)疗效。

方法与技术规范

传统片段长度分析(FLA)通过电泳分离PCR扩增产物检测变异，需匹配正常样本排除胚系变异。新一代测序技术可分析数万微卫星位点，采用20%变异阈值时灵敏度显著提升。值得注意的是：

1. 1.

   必须使用≥5个单核苷酸重复标记以提高MSH₆缺陷检出率

2. 2.

   不同肿瘤类型需独立验证，子宫内膜癌建议以免疫组化(IHC)为金标准

3. 3.

   避免使用肿瘤突变负荷(TMB)作为验证参照

临床解读与报告

报告需包含肿瘤细胞含量评估，关键建议包括：

• •

  MSI-H结直肠癌应检测BRAF^V600E和MLH₁启动子甲基化排除散发病例

• •

  MSI-L/MSI-I结果不能预测ICI疗效，但可能提示LS风险

• •

  子宫内膜癌中IHC与MSI结果不一致时，建议采用第三种方法验证

诊断流程标准化

图4展示了从样本质控到结果解读的完整路径：当肿瘤细胞含量<10%时需谨慎判读，MSI-H/dMMR结果应同步进行LS风险评估和ICI疗效预测。值得注意的是，约5% dMMR肿瘤存在MMR蛋白表达保留现象，需结合基因检测综合判断。

该指南首次统一了MSI检测的技术标准与临床解读框架，为精准医疗时代的肿瘤分子诊断提供了重要参考。