骆驼乳源Enterococcus faecium R9细菌素的广谱抗菌活性及其对生驼乳微生物组的调控作用

本研究揭示了骆驼乳源Enterococcus faecium R9菌株产生的细胞上清液（CFS）及多种肠球菌素（enterocins）的广谱抗菌机制，通过微孔板抑制实验和扫描电镜（SEM）证实其对单增李斯特菌（Listeria monocytogenes）、肠炎沙门氏菌（Salmonella Enteritidis）等食源性病原体的抑菌效果，并利用Illumina扩增子测序技术证明肠球菌素可显著提升生驼乳中乳酸菌（如Lactococcus、Streptococcus）丰度，为天然食品防腐剂开发提供新思路。

　　

Highlight

细菌培养与肠球菌素部分纯化

Enterococcus faecium R9在MRS琼脂（Thermo Fisher Scientific）中37°C有氧培养后，通过40%硫酸铵沉淀和凝胶过滤色谱（Superdex 75 10/300 GL）部分纯化肠球菌素。活性组分在17.2-19.8 ml洗脱体积内呈现至少两个抑菌峰，对单增李斯特菌（Listeria monocytogenes）展现出显著抑制活性。

肠球菌素部分纯化

采用标准蛋白分子量比对发现，活性组分分子量集中在3-10 kDa范围内，符合典型肠球菌素（enterocins B/P/X）特征。抑菌实验显示，这些组分能穿透革兰氏阴性菌（如E. coli O157:H7）的细胞壁形成孔洞，并通过溶解细胞膜抑制革兰氏阳性菌（如耐药Enterococcus faecium）。

结论

本研究证实Enterococcus faecium R9产生的CFS和肠球菌素具有双重抑菌机制：对单增李斯特菌在指数期表现为抑菌（bacteriostatic），在稳定期转为杀菌（bactericidal）；通过SEM观察到其能诱导病原体细胞表面孔洞形成或直接裂解。在生驼乳中，肠球菌素选择性抑制Rothia、Pseudomonas等致病菌，同时促进具有技术应用潜力的乳酸菌生长，为开发靶向性天然食品保鲜剂奠定基础。