三级淋巴结构分布与成熟度对可切除食管鳞癌新辅助放化疗联合免疫治疗疗效及预后的影响

本研究揭示了三级淋巴结构（TLSs）在可切除食管鳞癌（ESCC）新辅助放化疗联合免疫治疗（NRCI）中的关键作用。通过多色免疫荧光（mIHC）和全外显子测序（WES）技术，首次证实TLSs的分布、丰度及成熟度（M-TLSs）与患者总生存期（OS）显著相关，其中瘤内和浸润边缘TLSs丰度预示良好预后，而瘤周TLSs则相反。NRCI组较单纯新辅助化疗免疫治疗（NCI）组显著提升主要病理缓解率（MPR）并延长生存期，其机制与CD20+Ki-67+ B细胞、CD21+树突细胞（DCs）及CD8+Ki-67+ T细胞的活化增殖密切相关。

　　

1 引言

食管鳞癌（ESCC）是全球高致死性恶性肿瘤，5年生存率仅22%。尽管手术可切除，但复发率高，亟需创新疗法。新辅助放化疗联合免疫治疗（NRCI）通过放疗调控免疫微环境，显著提升病理完全缓解率（pCR），但三级淋巴结构（TLSs）在此过程中的作用尚不明确。TLSs作为肿瘤微环境中的异位淋巴聚集体，可促进抗原提呈和记忆T细胞生成，其成熟度（M-TLSs）与多种癌症预后相关。既往研究未区分NRCI的独立影响，本研究填补了这一空白。

2 材料与方法

157例可切除ESCC患者分为NRCI组（n=49）和NCI组（n=108），通过mIHC分析TLSs的空间分布及细胞组成（CD20⁺ B细胞、CD21⁺ DCs等），建立TLSs评分系统评估瘤内（T区）、浸润边缘（IM区）和瘤周（P区）的丰度与成熟度。全外显子测序（WES）分析20例未治疗样本的基因突变与TLSs关联。

3 结果

3.1 预后差异

NRCI组中位OS（27.4月）显著优于NCI组（23.15月），MPR率达73.5%（NCI组47.2%）。MPR患者OS与无病生存期（DFS）均延长。

3.2 TLSs区域特异性效应

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  瘤内与IM区：高TLSs丰度与较长OS相关（P<0.05），M-TLSs富集CD20⁺Ki-67⁺ B细胞和CD8⁺Ki-67⁺ T细胞。

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  瘤周区：高TLSs丰度反而缩短OS（P<0.001），提示免疫抑制微环境存在。

3.3 基因突变关联

仅NBEA突变与T区TLSs评分及成熟度潜在相关（P=0.037），其他高频突变（如TP53）无显著关联。

3.4 免疫细胞动态

NRCI组M-TLSs中增殖性免疫细胞（如CD4⁺Ki-67⁺ Th细胞）比例显著升高，而肿瘤细胞增殖标志PanCK⁺Ki-67⁺降低，证实放疗协同增强免疫应答。

4 讨论

NRCI通过诱导M-TLSs成熟并激活B细胞、DCs，优化抗肿瘤免疫。瘤周TLSs的负面预后或与M2巨噬细胞等抑制性细胞浸润有关。研究局限性包括样本量较小，需多中心验证。

5 结论

TLSs的分布与成熟度是NRCI疗效的独立预测指标。瘤内M-TLSs的免疫活化特征（尤其B细胞与DCs）为联合治疗策略提供新靶点，而瘤周TLSs的抑制作用提示微环境调控的重要性。