靶向B7-H3和CSPG4的CAR-T细胞在甲状腺未分化癌治疗中的突破性研究

本研究针对甲状腺未分化癌(ATC)这一致死率接近100%的难治性恶性肿瘤，创新性地开发了靶向B7-H3和CSPG4的二代CAR-T细胞疗法。通过体外实验和原位移植瘤模型证实，两种CAR-T细胞均能特异性识别并有效清除甲状腺癌细胞，其中B7-H3 CAR-T展现出更显著的肿瘤清除效果。该研究为缺乏有效治疗手段的ATC患者提供了新的免疫治疗选择，具有重要临床转化价值。

　　

甲状腺癌作为最常见的内分泌恶性肿瘤，其预后与病理亚型密切相关。虽然分化型甲状腺癌（如乳头状癌和滤泡状癌）患者对常规治疗反应良好，但占比较小的甲状腺未分化癌(Anaplastic Thyroid Cancer, ATC)却堪称"癌中之王"——具有极强的侵袭性和几乎100%的死亡率。这类患者中位生存期仅6个月，现有治疗方案收效甚微，即便是针对BRAF突变患者的靶向药物组合（达拉非尼+曲美替尼）也难逃耐药困境。面对这一严峻的临床需求，科学家们将目光投向了近年来在血液肿瘤中取得革命性突破的CAR-T细胞免疫治疗。

发表在《Journal of Experimental》上的这项研究创新性地选择B7-H3（B7 homolog 3）和CSPG4（Chondroitin Sulfate Proteoglycan 4）作为靶点。这两个靶标在多种实体瘤中高表达且参与肿瘤进展，但在正常组织中分布有限，能有效降低"脱靶毒性"。研究团队此前已在胰腺癌、卵巢癌等实体瘤中验证过这两种CAR-T细胞的抗肿瘤效果，此次将研究拓展至更具挑战性的ATC领域。

研究人员主要运用了以下关键技术：1）通过免疫组化(IHC)和公共数据库(GSE126698)分析靶抗原在甲状腺癌组织中的表达谱；2）采用含CD28共刺激域的第二代CAR构建体改造T细胞；3）建立原位移植瘤模型（将8505c-GFP.Luc细胞注射至NSG小鼠甲状腺）；4）通过生物发光成像(BLI)动态监测肿瘤负荷；5）采用流式细胞术评估CAR-T细胞表型和功能。

【CSPG4在各类甲状腺癌中高度且均匀表达】

通过分析公共数据库和免疫组化染色发现，CSPG4 mRNA在ATC中的表达显著高于其他亚型和正常组织。蛋白水平检测显示，73%的PTC、68%的FTC和全部ATC样本呈现中强阳性染色，而正常甲状腺组织几乎不表达。四种甲状腺癌细胞系（8505c、SW1736、2C-HCC、BCPAP）的膜表面CSPG4阳性率平均达84%。

【CSPG4 CAR-T细胞特异性识别并有效清除甲状腺癌细胞】

转导效率达65%的CSPG4 CAR-T细胞在体外展现出剂量依赖性杀伤效果，在1:1效靶比时对8505c和2C-HCC细胞的清除率达72%，但对表达量较低的BCPAP细胞效果减弱。值得注意的是，这些CAR-T细胞对CSPG4阴性的Jurkat和PDAC6细胞完全无杀伤作用，且仅在与靶细胞共培养时才分泌大量IL-2、TNF-α等效应因子。

【CSPG4 CAR-T细胞有效控制原位肿瘤生长并预防肺转移】

在小鼠模型中，CSPG4 CAR-T治疗组肿瘤重量较对照组显著减轻（p<0.01），且肺部未检测到转移灶。但值得注意的是，仅40%的小鼠实现完全缓解，提示单靶点治疗可能存在局限。

【B7-H3在甲状腺癌中的表达特征】

与CSPG4类似，B7-H3 mRNA在ATC中表达最高。令人惊讶的是，所有测试细胞系的B7-H3阳性率均达100%，且平均荧光强度是CSPG4的7倍，这为其作为更优靶点提供了理论基础。

【B7-H3 CAR-T细胞展现更强抗肿瘤活性】

在相同实验条件下，B7-H3 CAR-T对8505c细胞的杀伤效率达87.5%，显著高于CSPG4 CAR-T。实时成像显示前者在24小时内即启动显著杀伤，96小时近乎完全清除肿瘤细胞。这种优势在体内实验中得到验证——所有接受B7-H3 CAR-T治疗的小鼠均获得长期无瘤生存，而CSPG4 CAR-T组仅40%达到相同效果。

这项研究具有多重重要意义：首先，通过严谨的临床前实验证实B7-H3和CSPG4是甲状腺癌（尤其是ATC）的理想治疗靶点；其次，首次系统比较了两种CAR-T在ATC中的疗效差异，为临床方案选择提供依据；最重要的是，为目前缺乏有效疗法的ATC患者带来了新的希望。研究者特别指出，未来可探索双靶点CAR设计或联合放疗等策略进一步提升疗效。该成果已具备临床转化条件，特别适用于BRAF野生型或靶向治疗失败的ATC患者。

值得注意的是，虽然B7-H3 CAR-T展现出更优效果，但CSPG4 CAR-T仍具有一定优势——其识别的表位在肿瘤基质中也有表达，可能对肿瘤微环境产生更广泛影响。团队建议将两种CAR-T疗法纳入不同阶段的临床试验，并探索其与现有治疗的联合策略，最终为ATC这一"癌王"带来突破性治疗选择。