高效可重复的农杆菌介导薏苡茎尖遗传转化体系构建

为解决薏苡传统育种周期长、效率低的问题，研究人员以"兴仁小白壳"薏苡为材料，建立基于草铵膦(Basta)筛选的农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导茎尖遗传转化体系。优化发现OD600为0.80、0.055 MPa感染压力、15分钟侵染时间结合育苗海绵黑暗培养可获得6.67%转化率，并通过ddPCR和GUS染色证实外源基因可稳定遗传。该体系为薏苡种质创新提供重要技术支撑。

　　

在东亚和东南亚广泛种植的薏苡(Coix lacryma-jobi L.)兼具营养与药用价值，但传统育种效率低下。科研团队另辟蹊径，以"兴仁小白壳"品种为材料，打造了一套农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的茎尖转化"流水线"。通过草铵膦(Basta)这把"分子剪刀"，筛选出最佳工作浓度为100 mg/L。当菌液浓度(OD₆₀₀)调至0.80，在0.055 MPa压力下对裸露茎尖分生组织进行15分钟"基因快递"，配合育苗海绵的"暗室孵化"，最终实现6.67%的转化成功率。

研究团队运用该体系成功获得携带p9286 ubi Bar::GUS基因的转基因植株。经Basta喷雾"压力测试"和PCR"身份验证"后，数字PCR(ddPCR)和T1代幼苗GUS染色"亲子鉴定"证实，这些"基因改造"薏苡能将外源基因稳定传给后代。这项技术犹如为薏苡育种装上了"基因加速器"，为功能基因研究和品种改良开辟新途径。