NOTCH2通过Notch信号通路促进肝内胆管发育的分子机制及其在先天性胆管发育不良中的潜在治疗价值

本研究针对先天性肝内胆管发育不良的治疗难题，通过建立C57BL/6CrSlc小鼠模型，首次揭示雌激素通过上调Notch信号通路关键受体NOTCH2的表达，促进肝祖细胞(hepatoblast)向胆管细胞(cholangiocyte)分化的分子机制。研究发现NOTCH2 siRNA可显著抑制这一过程(p<0.05)，为Alagille综合征(ALGS)等胆汁淤积性疾病提供了新的治疗靶点。

　　

在肝胆系统发育的奥秘中，肝内胆管的形成犹如精密的"建筑工程"，而Notch信号通路就是这场建设的"总工程师"。Alagille综合征(ALGS)作为新生儿胆汁淤积的主要病因之一，其核心病理特征——小叶间胆管缺失，与JAG1或NOTCH2基因突变密切相关。令人困惑的是，携带相同基因突变的患者临床表现差异显著，这种"同病不同症"的现象长期困扰着临床医生。Chen Dong团队发表在《BMC Gastroenterology》的研究，就像一把解开这个谜题的钥匙。

研究人员采用三大关键技术：通过子宫内腺病毒载体注射建立NOTCH2 siRNA干扰模型；流式细胞术定量CK19⁺胆管细胞比例；结合免疫荧光和qPCR动态监测NOTCH2/Hes1表达。实验使用C57BL/6CrSlc小鼠胚胎肝组织作为样本来源。

【Increased level of NOTCH2 enhances hepatoblast differentiation】

研究发现雌激素处理使CK19⁺胆管细胞比例从2%飙升至41%(p<0.05)，NOTCH2 mRNA表达增加3.1倍。当引入NOTCH2 siRNA后，这种促进作用被显著削弱，胆管细胞比例降至27%，NOTCH2表达下降52%。

【Increased NOTCH2 level improves bile duct development】

在体实验证实，雌激素组NOTCH2蛋白表达强度较对照组提升2.95倍(p<0.05)，而NOTCH2 siRNA干预使该指标下降36%。免疫荧光显示胆管标记物CK19的表达变化与NOTCH2水平呈正相关。

这项研究首次阐明NOTCH2在胆管发育中的核心地位：雌激素通过激活Notch信号通路上调NOTCH2表达，进而促进Hes1等下游靶基因转录，最终驱动肝祖细胞向胆管细胞分化。特别值得注意的是，研究揭示了NOTCH2表达水平与胆管发育程度的剂量效应关系，这为解释ALGS患者的临床异质性提供了分子基础——不同个体可能存在NOTCH2表达补偿能力的差异。

研究提出的"NOTCH2补偿假说"具有重要转化价值：在JAG1突变患者中，通过药物诱导NOTCH2过表达可能激活替代配体(JAG2/DLL1)的结合，从而改善胆管发育。该发现不仅为ALGS的精准治疗指明新方向，也为其他Notch信号相关疾病的干预策略提供了范式参考。未来研究将在JAG1^+/dDSL突变模型中验证这一假说，推动从基础发现到临床应用的转化。