基于运动培养的乳腺癌组织切片外植体（MOTEX）维持肿瘤微环境成分的研究

为解决乳腺癌(BrC)个体化治疗中化疗/免疫治疗响应预测的难题，研究团队开发了MOtion-based Tissue EX vivo (MOTEX)培养系统，证实其可维持肿瘤切片中巨噬细胞、B细胞、T细胞等免疫组分的活力，并揭示蒽环类药物(FAC)特异性改变微环境组成。该研究为开发包含免疫组分的功能性预测 assays 提供了新模型，发表于《Neoplasia》。

　　

乳腺癌是全球女性健康的重要威胁，尽管早期诊断和治疗手段的进步提高了生存率，但如何为患者选择最优治疗方案仍是临床难题。分子标志物对化疗和免疫治疗响应的预测能力有限，而功能性检测可能是突破这一瓶颈的关键。肿瘤微环境(TME)中的免疫成分在治疗响应中扮演重要角色，但现有模型难以完整保留这些复杂相互作用。Zofia M. Komar团队在《Neoplasia》发表的研究，为这一领域带来了创新解决方案。

研究团队此前开发的MOtion-based Tissue EX vivo (MOTEX)培养系统，通过连续旋转运动维持组织活力，已成功用于顺铂、微管抑制剂等药物的敏感性预测。但该系统是否保留TME的关键组分尚未系统评估。这项研究首次全面解析了MOTEX培养中TME的保存状态，为开发包含免疫组分的功能性检测奠定了基础。

关键技术包括：1) 使用手术切除和活检获取的BrC组织样本（n=34）；2) 300 μm切片在定制培养基中动态培养；3) 紫杉烷类（paclitaxel/docetaxel）和FAC处理；4) 多重免疫荧光(MIF)检测PCK、CD20、CD4、CD8、CD68、CD163等标志物；5) QuPath软件定量分析细胞组成。

MOTEX culture preserves the leukocytes within BrC tissue slices

通过H&E染色和CD45免疫组化证实，3天MOTEX培养后白细胞比例保持稳定。5-plex MIF显示肿瘤细胞(PCK⁺)、巨噬细胞(CD68⁺)、B细胞(CD20⁺)和T细胞(CD4⁺/CD8⁺)均存活，且延长培养至7天仍无凋亡增加。

Evaluation of the heterogeneity within the primary BrC samples

比较随机分配与顺序分配的切片，发现免疫浸润程度在肿瘤内部相对均一。来自同一患者的双活检样本也显示相似的TME组成，支持该模型的可靠性。

TME composition after ex vivo chemotherapy treatment

紫杉烷类处理未显著改变TME组成，而FAC处理导致肿瘤细胞(PCK⁺)减少和CD8⁺ T细胞比例升高，同时M2型巨噬细胞(CD163⁺)减少，提示向促炎性微环境转变。三阴性乳腺癌(TNBC)对FAC的TME改变更显著。

Increased pretreatment T-cell levels in ex vivo taxane sensitive samples

在9例紫杉烷敏感样本中，5例呈现高CD45⁺和高T细胞水平，但未发现明确阈值。M1/M2巨噬细胞比例与敏感性无显著关联。

TME and FAC response

临床敏感患者（尤其完全缓解者）活检显示更高基线CD45⁺细胞浸润，而ex vivo FAC敏感性与M2巨噬细胞水平呈负相关。

讨论部分强调，MOTEX是首个经系统验证可维持BrC完整TME的离体模型。虽然循环免疫细胞的缺失是当前局限，但该模型已能捕捉FAC诱导的M2向M1巨噬细胞转化等关键事件。研究为联合功能性检测与TME分析提供了技术框架——例如将免疫评分纳入现有REMIT assay（基于EdU/pH3的紫杉烷敏感性检测），可能提升预测准确性。未来可拓展至免疫检查点抑制剂研究，通过添加自体免疫细胞进一步模拟体内环境。

这项由荷兰Erasmus MC团队完成的工作，为乳腺癌精准医疗提供了兼具创新性和实用性的研究工具，其价值已在临床前研究中得到验证，下一步将在更大队列中测试其预测效能。