马肉中Sarcocystis bertrami（同物异名S. fayeri）的cox1与LSU rDNA分子多样性研究及其公共卫生意义

本研究针对生马肉中Sarcocystis污染引发的食源性疾病问题，通过分析150匹马（含进口与本土样本）肌肉组织的58个包囊，首次系统揭示了S. bertrami（原S. fayeri）的线粒体cox1基因与核糖体LSU rDNA的分子特征。研究发现：1）传统形态学分型的两个种实为同种；2）cox1存在宿主个体间变异但无个体内变异；3）LSU rDNA存在显著的基因组内多态性。该成果为马肉食品安全评估提供了分子依据，发表于《Parasitology International》。

　　

研究背景

生马肉消费引发的Sarcocystis感染已成为全球性公共卫生挑战。传统上根据包囊形态的直立型（S. fayeri）与褶皱型（S. bertrami）进行物种区分，但近年基于少量样本的rDNA和线粒体cox1（细胞色素c氧化酶亚基I）基因研究暗示二者可能是同种。这一争议直接影响食源性寄生虫的精准溯源与风险评估。

研究设计与方法

研究团队从日本（33匹）、加拿大（76匹）和法国（41匹）的150匹马肌肉样本中分离包囊，对71例阳性样本（加拿大71匹/法国2匹/日本3匹）进行基因分析。关键技术包括：1）针对cox1和LSU rDNA（大亚基核糖体DNA）的PCR扩增与测序；2）克隆测序技术解析LSU rDNA多态性；3）生物信息学比对GenBank中53条相关序列。

研究结果

1.cox1基因分析

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  新获得的53条cox1序列与GenBank中S. bertrami/S. fayeri/S. asinus序列显示100%同源性，证实三者实为同一物种。

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  发现宿主个体间存在单核苷酸多态性（SNP），但同一宿主体内包囊无变异，提示基因漂变可能源于宿主迁移。

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  部分样本因引物设计问题扩增出核内线粒体伪基因（NUMT），凸显实验设计严谨性的重要性。

2.LSU rDNA多态性

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  从54个包囊获得的211条克隆序列显示：

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    个体间变异率达12.7%，且同一宿主体内存在显著差异（如克隆序列相似性仅89.3%）。

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    核糖体基因阵列（rRNA array）存在基因组内嵌合现象，首次揭示S. bertrami核糖体操纵子的进化动态。

结论与意义

该研究通过多基因联合分析，彻底解决了S. bertrami与S. fayeri的分类争议，证明传统形态学分型不可靠。LSU rDNA的基因组内多态性为Apicomplexa（顶复门）寄生虫的分子进化研究提供了新视角。实践层面：1）为马肉国际贸易的寄生虫检测建立分子标准；2）警示NUMT对分子诊断的干扰风险。论文由熊本县肉品检验中心的Junko Toda团队完成，成果对完善食源性寄生虫防控体系具有里程碑意义。