华蟾素通过激活MHC I和CD8+ T细胞克服结直肠癌免疫抑制微环境的机制研究

本研究针对结直肠癌(CRC)免疫抑制微环境导致的治疗抵抗问题，探索传统中药华蟾素(Huaier)的免疫调节机制。团队通过临床队列分析、动物模型和类器官实验证实，华蟾素通过STAT1-MHC I通路增强抗原呈递，促进CD8+ T细胞浸润与杀伤功能，并与PD-1抑制剂展现协同效应，为CRC免疫治疗提供新策略。

　　

结直肠癌(CRC)是全球癌症相关死亡的主要原因之一，其免疫抑制微环境导致肿瘤逃逸和治疗抵抗是临床面临的重大挑战。尽管免疫检查点抑制剂(如PD-1/PD-L1抗体)在部分患者中展现出疗效，但多数CRC患者响应率不足15%，这与肿瘤细胞主要组织相容性复合体I类分子(MHC I)表达缺失导致的抗原呈递缺陷密切相关。传统中药华蟾素(Huaier)在肝癌、乳腺癌等恶性肿瘤中显示出抗肿瘤活性，但其对CRC免疫微环境的调控机制尚不明确。

发表在《Phytomedicine》的这项研究，通过多维度实验体系揭示了华蟾素重塑CRC免疫微环境的新机制。研究人员首先对复旦大学附属肿瘤医院的13,301例CRC患者进行回顾性队列分析，通过倾向评分匹配(PSM)消除混杂因素后，发现华蟾素治疗组患者总生存期显著延长(HR=0.682)。在AOM/DSS诱导的CRC小鼠模型中，华蟾素不仅减少肿瘤负荷，还通过上调紧密连接蛋白(ZO-1/occludin)和黏液蛋白MUC2修复肠道屏障，降低血清LPS水平。

关键技术包括：临床队列的PSM分析、AOM/DSS和MC38皮下移植瘤模型、流式细胞术检测免疫细胞亚群、RNA-seq与GSEA通路分析、STAT1基因沉默实验、人源CRC类器官与T细胞共培养系统等。

Huaier improves overall survival in colorectal cancer patients

通过1:1 PSM匹配1,198对患者后，多因素Cox分析显示华蟾素是独立预后因素，且治疗1年后肝肾功能指标保持正常，证实其安全性。

Huaier reduces tumor burden in colorectal cancer mouse models

高剂量华蟾素(H-Huaier)使AOM/DSS模型肿瘤发生率降低16.7%，MC38移植瘤体积缩小，Ki-67阳性细胞减少，证实其直接抗肿瘤效应。

Huaier restores intestinal barrier function

透射电镜显示华蟾素维持肠上皮紧密连接结构，血清FITC-葡聚糖渗透率降低42%，Western blot证实ZO-1/occludin蛋白表达上调2.1倍。

Huaier reverses the immune-suppressive tumor microenvironment

RNA-seq揭示免疫相关通路富集，流式检测显示CD8⁺ T细胞浸润增加1.8倍而Tregs减少35%，且细胞毒性标志物GZMB/IFN-γ表达增强。

Huaier enhances antigen presentation

GSEA显示MHC I通路显著激活，MC38-OVA细胞中SIINFEKL-H2K^b复合物表达提升3倍，OT-I T细胞杀伤效率在E:T=10:1时提高60%。

Huaier increases MHC I expression by upregulating STAT1 phosphorylation

Western blot显示华蟾素剂量依赖性激活p-STAT1，si-Stat1转染可阻断HLA-ABC/B2m上调，免疫荧光证实MHC I膜定位增强。

Huaier enhances antigen presentation in human organoids

类器官实验显示8mg/ml华蟾素使HLA-ABC表达增加2.3倍，共培养系统中CD8⁺ T细胞分泌IFN-γ水平提升75%。

Huaier combined with anti-PD-1 enhances the anti-tumor effect

联合治疗使MC38肿瘤体积缩小68%，显著优于单药组，流式检测显示肿瘤内GZMB⁺IFN-γ⁺ CD8⁺ T细胞比例增加2.1倍。

讨论部分强调，该研究首次阐明华蟾素通过STAT1-MHC I轴"双管齐下"的作用机制：既增强肿瘤细胞抗原可见性，又逆转T细胞耗竭。值得注意的是，华蟾素不改变PD-L1表达，提示其与PD-1抑制剂的协同作用源于互补机制。类器官模型验证了转化医学价值，而肠道屏障修复作用为预防炎症相关CRC提供新思路。

局限性包括回顾性临床数据的固有偏倚、活性成分未明确等。未来需开展多中心随机对照试验，并分离鉴定华蟾素中调控STAT1的关键组分。这项研究为整合传统中药与现代免疫治疗提供了范式，MHC I上调和肠道屏障保护的双重功效使其在CRC防治中具有独特应用前景。