氮芥诱导角膜组织进行性损伤中程序性细胞死亡（Necroptosis）的关键作用及治疗靶点研究

（编辑推荐语）本研究通过猪角膜离体培养和大鼠在体实验，首次揭示氮芥（NM）暴露通过诱发DNA损伤（γH2AX标记）和激活受体相互作用蛋白激酶3（p-RIPK3）依赖性坏死性凋亡（necroptosis），导致角膜进行性损伤。研究发现靶向抑制necroptosis可有效缓解NM引起的角膜基质破坏和紧密连接丧失，为芥子气类毒剂致眼表损伤提供了新型治疗策略。

　　

Highlight

氮芥引发角膜组织破坏与程序性细胞死亡

我们首先采用1、5和10 mg/ml氮芥（NM）处理猪角膜10分钟测试剂量效应（图1A，n=5）。5 mg/ml NM引发显著上皮损伤，而10 mg/ml导致上皮层完全脱落（未展示）。选择5 mg/ml浓度进行后续实验显示：暴露后1天（1 dpe）出现凋亡标志c-Casp3⁺细胞，2 dpe时坏死性凋亡关键蛋白p-RIPK3⁺细胞占比激增，伴随基底膜崩解——这像一场"细胞死亡接力赛"，凋亡先导而坏死性凋亡终局。

讨论

本研究首次在体证实NM通过"双阶段杀伤"机制破坏角膜：早期（1 dpe）表现为迁移上皮细胞的凋亡（apoptosis），后期（2 dpe）则转化为大规模坏死性凋亡（necroptosis）。有趣的是，基质细胞虽呈现TUNEL⁺但缺乏c-Casp3/p-RIPK3标记，暗示存在未知死亡通路。就像拆毁房屋需要不同工具，NM可能通过多种死亡程序协同破坏角膜——抑制坏死性凋亡的实验组成功保护角膜结构，为开发"死亡开关抑制剂"类眼用药物提供了理论依据。