谷物产品中多烷基间苯二酚的高效液相色谱-柱后荧光衍生化精准检测方法研究

本研究创新性地采用高效液相色谱(HPLC)结合柱后荧光衍生化技术，以多巴胺(DA)为衍生试剂，建立了谷物中5种烷基间苯二酚(ARs)同系物(C17:0-C25:0)的高灵敏度检测方法。该方法在0.2-20,000 ng/mL范围内线性良好，检测限低至0.015-0.040 ng/mL，加标回收率达98.96%-107.92%，为全谷物食品质量评估和健康效益研究提供了可靠的分析工具。

　　

Highlight

采用多巴胺(DA)作为柱后荧光衍生试剂，基于烷基间苯二酚(ARs)与DA在碱性条件下的特异性反应，开发出具有超强抗干扰能力的高灵敏度HPLC检测体系。

Materials and methods

实验选用五种典型ARs同系物：5-十七烷基间苯二酚(C17:0)、5-十九烷基间苯二酚(C19:0)、5-二十一烷基间苯二酚(C21:0)、5-二十三烷基间苯二酚(C23:0)和5-二十五烷基间苯二酚(C25:0)。通过优化发现最佳检测条件为：乙醇-乙腈(3:7)流动相、0.5 mg/mL DA衍生试剂、缓冲液pH 13。该条件使检测灵敏度较传统方法提升1-2个数量级。

The feasibility of detection

如图1A-E所示，ARs分子结构中5位烷基链长度不同，但均含有能与DA发生缩合反应的间苯二酚基团。在碱性条件下，该反应迅速生成具有强荧光的氮杂马兜铃酸类似物(图1F)，溶液显黄色并产生显著荧光增强效应，为高选择性检测奠定基础。

Conclusion

本方法成功克服了传统分光光度法选择性差、GC-MS前处理复杂等缺点，首次实现谷物复杂基质中多种ARs同系物的同步精准检测。0.015 ng/mL的检测限和<5%的RSD验证了方法的可靠性，为全谷物食品真实性鉴别和营养流行病学研究提供了关键技术支撑。