流式细胞术荧光信号不确定度量化研究：超越检测效率(Q)与背景(B)的分析视角

来自美国国家标准与技术研究院(NIST)的研究人员针对流式细胞仪检测效率(Q)和背景(B)估算这一困扰学界30余年的难题，创新性地提出全局数据分析策略。该研究通过整合不同增益下的测量数据，同步考量常被忽视但至关重要的增益无关背景效应，不仅获得稳定的Q/B估计值，更能量化其他噪声源的相对影响。这项研究首次明确定义了"仅与仪器性能相关的检测限与定量限"，为跨平台仪器比较提供了样本无关的不确定度指标，相关成果已通过商用仪器和NIST自主研发的串行细胞仪验证。

　　

这份手稿作为系列研究的开篇之作，将计量学与不确定度量化(UQ)的核心思想创新性地引入流式细胞术领域。研究直指流式细胞仪两大核心参数——检测效率(Q)和背景(B)的估算难题。尽管该领域已有三十余载的研究积累，传统解决方案却因简化噪声模型而导致参数估计不稳定，甚至出现负值的荒谬结果，更难以实现仪器间的客观比较。

研究团队另辟蹊径，开发出全局数据分析新策略：通过整合不同增益条件下的测量数据，同时捕捉常被忽视却举足轻重的增益无关背景效应。这种方法不仅能够稳定获取Q/B参数，更能精确量化各类噪声源的相对贡献。更具突破性的是，该研究首次明确定义了"纯仪器性能相关的检测限与定量限"，有效剥离样本制备、操作者影响等干扰因素，为跨平台仪器比较建立了样本无关的不确定度评价体系。

实验验证环节颇具说服力，既采用商用流式细胞仪，又动用NIST自主研发的串行微流控细胞仪进行交叉验证。这项研究不仅系统阐释了现有分析方法的缺陷根源，更提供了优化仪器性能的量化依据，系列成果中的延伸研究将在后续论文中陆续展现。值得一提的是，研究者们已就串行微流控细胞仪技术申请了专利保护。