白三烯抑制剂孟鲁司特与齐留通通过调控中性粒细胞募集及ERK1/2信号通路缓解急性呼吸窘迫综合征的机制研究

这篇研究揭示了白三烯抑制剂孟鲁司特（Montelukast，CysLTR1拮抗剂）和齐留通（Zileuton，5-LOX抑制剂）在LPS诱导的急性呼吸窘迫综合征（ARDS）模型中通过抑制中性粒细胞（PMN）迁移、下调黏附分子（PSGL-1/LFA-1）表达、减少促炎因子（TNF-α/IL-6）释放，并阻断ERK1/2信号通路，为靶向治疗ARDS过度炎症反应提供新策略。

　　

3.1 孟鲁司特与齐留通减少中性粒细胞向支气管肺泡腔迁移

研究通过LPS诱导的小鼠ARDS模型发现，两种白三烯抑制剂显著降低中性粒细胞在支气管肺泡灌洗液（BAL）中的浸润，但对其在肺间质的滞留无显著影响。免疫组化与流式细胞术显示，药物干预后24小时，Ly6G⁺中性粒细胞在肺泡腔的计数下降超过50%，提示药物可能通过阻断跨上皮迁移步骤发挥作用。

3.2 药物调控中性粒细胞黏附分子表达

流式分析揭示，孟鲁司特全面抑制PSGL-1在血液、肺组织和BAL中的表达，而齐留通特异性降低LFA-1在肺组织的水平。L-选择素仅在血液循环中被孟鲁司特下调，表明两种药物通过不同机制干扰中性粒细胞与内皮/上皮的相互作用，从而抑制其迁移能力。

3.3 促炎因子释放的差异性抑制

ELISA检测显示，两种药物均显著降低BAL中CXCL2、IL-1β和IL-6水平，但仅孟鲁司特对TNF-α有抑制作用。值得注意的是，CXCL1未受影响，提示白三烯通路对特定趋化因子的调控具有选择性，可能与NF-κB等其他通路交叉作用有关。

3.4 体外实验验证药物直接抑制中性粒细胞趋化

采用微流控活细胞成像技术证实，10 μM浓度的孟鲁司特或齐留通预处理可使中性粒细胞在fMLP梯度下的迁移累积距离减少60%-70%，运动速度下降40%。该结果直接支持药物对中性粒细胞趋化能力的自主调控作用。

3.5 白三烯受体表达下调

免疫荧光显示，药物干预后肺组织中性粒细胞表面CysLTR1受体表达量降低50%以上。这一发现首次揭示白三烯抑制剂不仅能阻断受体功能，还可通过负反馈调节减少受体表达，形成双重抑制机制。

3.6 ERK1/2信号通路的关键作用

qPCR与免疫印迹分析表明，LPS刺激显著上调ERK1/2 mRNA表达，而药物干预使ERK1（MAPK3）表达量恢复至基线水平。尽管磷酸化ERK1/2水平未改变，但总蛋白量减少提示药物可能通过降低ERK1/2合成来削弱下游炎症信号传导。

4 讨论

研究系统阐明白三烯抑制剂通过多靶点协同作用缓解ARDS的分子机制：从上游阻断CysLTR1受体表达，到中游抑制ERK1/2信号转导，最终下调黏附分子和炎症因子释放。相较于糖皮质激素的广谱免疫抑制，这种靶向干预策略可能更适用于需要保留部分免疫功能的临床场景。未来研究可探索其与A2B腺苷受体激动剂或miRNA疗法的联合应用潜力。