基于纠错新一代测序与DNA甲基化定量的小鼠NDMA遗传毒性阈值测定研究

来自全球的研究人员针对药物中N-亚硝基二甲胺(NDMA)污染问题，通过高精度LC-MS/MS结合纠错新一代测序(ecNGS)技术，定量评估了NDMA诱导的DNA加合物与体细胞突变。研究发现NDMA在≥1 mg/kg/day剂量下显著增加肝脏CG>TA/TA>CG突变特征（类似COSMIC signature 11），基于BMD50模型推算出245 ng/day的允许日暴露量(PDE)，为现行监管标准(96 ng/day)提供了科学修正依据，展示了ecNGS在遗传毒性评估中的监管应用潜力。

　　

药物中N-亚硝胺(N-NAs)污染引发的致癌风险已成全球焦点，其中N-亚硝基二甲胺(NDMA)作为最常见的遗传毒性杂质，现行96 ng/day的安全限值仅基于啮齿类动物数据的线性外推。科学家们采用突破性的"分子侦探"技术组合——高精度液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)与纠错新一代测序(ecNGS)，在小鼠肝脏中捕捉到NDMA代谢激活后形成的N⁷-甲基鸟嘌呤加合物，并绘制出剂量依赖的突变图谱。当剂量≥1 mg/kg/day时，突变频率显著攀升，特征性的CG>TA和TA>CG碱基转换（与烷化剂特征COSMIC signature 11高度吻合）揭示了NDMA的基因剪刀效应。通过基准剂量(BMD)模型计算，DNA加合物与突变的BMD₅₀分别为0.08-0.32 mg/kg和1.64-3.83 mg/kg，据此推导的245 ng/day允许日暴露量(PDE)像一把经过校准的新标尺，为更精准的药品安全评估提供了分子证据链。这项研究不仅为NDMA污染药物的风险管理提供了量化工具，更展示了ecNGS这项"基因纠错机"技术在毒理学评估中的革命性应用前景。