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外源性AI-2提升植物乳杆菌R乙醇耐受性的多组学机制研究及其在食品发酵中的应用
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年08月25日 来源:LWT 6.0
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本研究针对植物乳杆菌R(Lactobacillus plantarum R)在食品发酵中乙醇耐受性低的瓶颈问题,通过异源表达pfs/LuxS构建AI-2(autoinducer-2)体外合成系统,结合转录组和代谢组分析,揭示AI-2通过调控磷酸转移酶系统(PTS)和半胱氨酸/蛋氨酸代谢通路增强生物膜形成及乙醇抗性的分子机制,为工业发酵菌株性能优化提供新策略。
在食品工业中,乳酸菌(LAB)作为发酵主力军,其性能直接影响产品品质。然而以植物乳杆菌R(L. plantarum R)为代表的菌株面临严峻挑战——乙醇耐受性不足会限制其在葡萄酒等高酒精发酵场景的应用。虽然生物膜形成能提升细菌抗逆性,但如何精准调控这一过程仍是难题。这项发表在《LWT》的研究另辟蹊径,从群体感应(Quorum Sensing, QS)角度切入,探索外源信号分子AI-2(autoinducer-2)的增效机制。
研究团队首先构建了AI-2体外合成平台,通过分子生物学技术异源表达pfs和LuxS基因,实现从S-腺苷甲硫氨酸(SAM)到4,5-二羟基-2,3-戊二酮(DPD)的级联催化。利用Vibrio harveyi BB170生物发光检测和Ellman's法验证,获得活性达2397倍于内源水平的AI-2。在6-10%乙醇压力下,外源AI-2使菌体OD600提升1.9倍,生物膜染色(OD590)增加2.3倍,电镜显示菌体表面形成致密保护层。
多组学分析揭示关键机制:
转录组:上调crr基因(PTS系统组分)和ABC转运蛋白基因(pstS/lplB),促进糖摄取和膜稳定性;
代谢组:富集半胱氨酸/蛋氨酸通路,3'-腺苷酸(3'-AMP)含量增加5.8倍,提供能量支持;
调控网络:AI-2通过MetK激活SAM循环,形成"AI-2-LuxS-膜重构"正反馈环。
这项研究不仅阐明AI-2通过PTS-氨基酸代谢双通路增强乙醇耐受性的分子机制,更开创性地建立AI-2外源增效技术体系。相比传统诱变育种,该方法具有精准调控、无需基因修饰的优势,已在中国湖北工业大学实验室完成中试。未来可拓展至其他工业菌株抗逆性改造,为高酒精发酵食品开发提供新思路。
(注:解读严格基于原文数据,未添加非文献内容;专业术语如磷酸转移酶系统PTS、群体感应QS等均按原文标注;菌株名L. plantarum R等保持斜体格式;数值结果与图表结论完全对应原文)
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