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综述:分子识别驱动β-乳球蛋白检测的机制、进展与未来展望
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年08月25日 来源:TrAC Trends in Analytical Chemistry 11.8
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这篇综述系统梳理了牛乳主要过敏原β-乳球蛋白(BLG)的检测技术进展,重点探讨了基于抗体、适配体(aptamers)、分子印迹聚合物(MIPs)等7类分子识别元件的检测策略,以及质谱(MS)和光谱等直接检测方法。文章深入分析了8种识别模式和3个结合位点,评估了不同检测平台的灵敏度(LOD达2 μg/mL)和适用性,并展望了纳米材料、微流控与智能传感技术的融合前景,为开发高精度便携式BLG生物传感器提供了重要参考。
作为牛乳中含量最高的乳清蛋白组分,β-乳球蛋白(BLG)因其含55个半胱氨酸形成的稳定寡聚体结构,能在人体胃肠道消化过程中保留致敏肽段。研究表明,仅1-10 mg牛奶蛋白即可引发过敏人群的IgE介导的I型超敏反应,表现为荨麻疹、呼吸道炎症甚至过敏性休克。尽管热加工、高压处理等技术可降低BLG致敏性,但可能伴随高级糖基化终产物(AGEs)等有害副产物生成,使得精准检测成为保障食品安全的关键——现行安全阈值设定为100 μg/mL,而检测方法需达到2 μg/mL的灵敏度。
BLG检测的核心在于利用氢键、疏水作用等非共价相互作用实现特异性结合。目前形成7大类识别策略:
抗体:依赖抗原表位结合,但易受食品基质干扰
适配体:通过SELEX技术筛选的核酸适体,具有高热稳定性
特异性结合肽(SBPs):人工设计的短肽链,可识别BLG线性表位
分子印迹聚合物(MIPs):模拟抗体结合腔的合成材料
荧光探针:基于BLG色氨酸残基的内源荧光特性
金属纳米酶:利用类过氧化物酶活性催化显色反应
引物:靶向BLG基因组序列的PCR检测
电化学传感器通过阻抗变化量化BLG结合事件,而表面等离子共振(SPR)技术可实现实时无标记检测。值得关注的是,量子点标记的侧向流动试纸条已实现10 ng/mL的视觉化检测限,微流控芯片则显著提升了复杂食品基质中的分析通量。相比之下,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)通过特征肽段m/z值提供"黄金标准"级结果,但前处理需经历还原烷基化、酶解等繁琐步骤。
当前技术面临食品加工导致的蛋白变构识别难题。新兴解决方案包括:
深度学习辅助的多组学数据整合
上转换纳米粒子(UCNPs)增强的近红外检测
纸基微流控与智能手机联用的现场检测系统
研究者特别强调需开发能区分天然与变性BLG的仿生识别界面,这对评估热加工食品致敏性至关重要。
随着精准营养理念的普及,BLG检测技术正向着智能化、微型化方向发展。下一代生物传感器将深度融合纳米材料工程与数字分析技术,为过敏风险防控提供更强大的工具支撑。
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