尿液雌二醇-3-葡萄糖醛酸和孕烷二醇-3-葡萄糖醛酸水平反映家犬卵巢功能的研究

为解决家犬(Canis familiaris)生殖周期无创监测难题，研究人员通过ELISA法测定43只雌犬603份尿液样本中E2G和PdG浓度，建立线性混合模型分析激素代谢规律。结果显示E2G峰值出现在阴道血性分泌物第6天，PdG浓度在3周内缓慢升至峰值。该研究首次证实尿液甾体代谢物可作为家犬卵巢功能监测的生物标志物，为犬科动物生殖生理研究提供新方法。

　　

家犬作为人类最早驯化的物种之一，其生殖生理研究却存在显著空白。传统血清激素检测需要频繁采血，而阴道细胞学检查又具有侵入性，这使得犬科动物生殖周期监测面临重大技术瓶颈。更棘手的是，现有文献对家犬尿液雌激素和孕酮代谢产物的研究数据极为匮乏，最近的相关报道竟可追溯至半个世纪前。这种现状严重制约了犬类繁殖管理、野生动物保护（如非洲野犬）以及比较医学研究的发展。

正是在这样的背景下，芬兰东部大学药学院的Tia M. Pennanen团队开展了一项创新性研究。他们意识到尿液样本具有采集无创、操作简便的优势，但关键在于能否找到可靠的激素代谢标志物。在其它哺乳动物如野牛、奶牛和大熊猫中，孕烷二醇-3-葡萄糖醛酸(PdG)已被证实能有效反映孕酮(P4)变化，而雌二醇-3-葡萄糖醛酸(E2G)则与雌激素水平相关。然而，这些发现在犬科动物中是否适用尚属未知。

研究人员采用横跨4年的队列研究设计，收集43只雌犬50个生殖周期的603份晨尿样本。通过开发特异性ELISA检测方法，首次建立了家犬尿液E2G和PdG的动态变化模型。研究发现E2G浓度在阴道血性分泌物出现后第6天达到峰值(69±18 ng/Crmg)，随后一周内降至峰值的三分之一；而PdG浓度从基线(21±10 ng/Crmg)缓慢上升，在19-20天达到最大值(89±19 ng/Crmg)。这些变化趋势与文献报道的血清激素谱高度吻合，证实尿液代谢物确实能反映卵巢功能状态。该成果发表于《Animal Reproduction Science》，为犬科动物生殖研究开辟了非侵入性监测新途径。

关键技术方法包括：1) 建立竞争性ELISA检测体系，使用兔多克隆抗体测定E2G和PdG，检测限分别为20.4 pg/mL和0.97 ng/mL；2) 采用自由捕捉法收集43只不同品种雌犬的晨尿样本，通过肌酐校正消除尿液浓度差异；3) 运用线性混合模型处理重复测量数据，包含自然样条函数和ARMA过程校正异方差性；4) 通过繁殖行为记录和妊娠结果验证模型生物学意义。

研究结果方面，"3. Results"部分显示：E2G模型(n=9只犬196样本)显示峰值出现在第6天，到第18天显著下降至19±11 ng/Crmg；PdG模型(n=43只犬591样本)显示浓度从第0天21±10 ng/Crmg升至第19-20天峰值。值得注意的是，虽然整体趋势明确，但个体差异显著——6只拉布拉多犬的PdG浓度就存在明显变异，提示体型可能不是影响代谢的唯一因素。"4. Discussion"部分指出：这是首个同时检测家犬尿液E2G和PdG的研究，其变化规律与血清激素文献一致，证实了方法的可行性。但当前PdG检测的批间变异系数达24.3%，需进一步优化灵敏度。

结论与讨论强调：尽管存在技术改进空间，该研究首次证实尿液E2G和PdG可作为家犬卵巢功能的可靠标志物。特别是E2G检测已具备实用价值，而PdG检测则需提高精度以准确判断黄体活动起始。这项研究不仅填补了犬科动物生殖生理学的知识空白，其非侵入性特点更使得大规模野外研究和家庭宠物监测成为可能。未来研究应着重验证尿液PdG与血清P4的相关性，并探索个体差异的代谢基础，这将为犬类繁殖管理、濒危犬科动物保护以及人类妇科疾病模型研究提供重要工具。