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甘蔗双病毒快速检测技术突破:基于粗提叶片的双联RT-RPA方法在种苗认证中的应用
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年08月26日 来源:Sugar Tech 2
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为解决甘蔗条纹花叶病毒(SCSMV)和黄叶病毒(ScYLV)导致的严重减产问题,研究人员开发出革命性双联RT-RPA检测技术。该技术采用50 mM NaOH/2.5 mM EDTA(pH8.0)粗提叶片样本,40℃下30分钟即可完成双病毒同步检测,灵敏度达10–5稀释度,为甘蔗种苗认证和病毒防控提供高效解决方案。
甘蔗种植业正面临条纹花叶病毒(Sugarcane streak mosaic virus, SCSMV)和黄叶病毒(Sugarcane yellow leaf virus, ScYLV)的双重威胁,这两种病原体可造成严重产量损失。最新研究突破性地建立了双联逆转录重组酶聚合酶扩增(duplex RT-RPA)检测体系,在资源有限的条件下,仅需40℃恒温环境30分钟即可实现双病毒同步检测。
这项技术的创新之处在于采用50 mM氢氧化钠与2.5 mM乙二胺四乙酸(EDTA)(pH 8.0)的1:1混合液进行叶片粗提,完全规避了传统复杂的核酸提取流程。特异性测试显示,该方法对甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus, SCMV)无交叉反应,证实其高度特异性。灵敏度评估更令人振奋,检测下限达到10–5的超高灵敏度。
通过与传统双联RT-PCR方法的对比验证,所有症状样本均被准确检出。这项技术突破为甘蔗种苗大规模病毒筛查认证提供了革命性工具,将有效遏制病毒在全国范围内的传播扩散,对保障甘蔗产业健康发展具有重大意义。
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