日本HBsAg+/HBcAb+/HBsAb-献血者中HBV基因突变特征分析：为疫苗接种策略提供基线数据

本研究针对日本推行乙肝疫苗普遍接种后的HBV流行趋势监测需求，对33例HBsAg+/HBcAb+/HBsAb-献血者样本进行全基因组测序，首次系统揭示了基因型B/C中高频存在的免疫逃逸突变（如sG145A）、核心启动子1762/1764双突变（HCC风险因子）及前核区1896无义突变（FH关联），为评估疫苗对突变谱的影响奠定关键基线。

　　

乙型肝炎病毒（HBV）感染仍是全球重大公共卫生挑战，尽管疫苗接种显著降低了传播率，但病毒变异带来的免疫逃逸和疾病进展风险始终悬而未决。日本2016年启动全民乙肝疫苗接种后，亟需建立突变监测体系以评估疫苗对病毒进化的影响。尤其令人担忧的是，无症状携带者体内潜伏的HBV可能携带与肝癌（HCC）或暴发性肝炎（FH）相关的关键突变，这些"沉默的定时炸弹"尚未被充分认知。

研究团队创新性地聚焦HBsAg⁺/HBcAb⁺/HBsAb^-献血者群体——这类人群通常 unaware of their infection status（不知自身感染状态），却能反映病毒在自然传播中的真实进化特征。通过实时荧光定量PCR（qPCR）和Sanger测序技术，研究人员成功对32例样本完成全基因组测序，并采用邻接法（neighbor-joining method）进行基因分型分析。

主要研究结果

1. 全基因组测序与基因型分布

在东京/千叶/神奈川地区献血者中，基因型C2（46.9%）和B1（18.8%）占主导，与日本历史流行株一致。值得注意的是，一例基因型A1毒株出现preS1蛋白N端缺失（S17_F25del）和S蛋白起始密码子突变（sM1K），这类结构变异可能影响病毒颗粒组装。

2. 免疫逃逸突变热点

基因型B在S蛋白主要亲水区（MHR）呈现突变富集：77.8%样本携带sL21S/sG145A等逃逸突变，显著高于基因型C（53%）。尤其引人注目的是，基因型A中28.6%的毒株因preS2缺失（G138_Y140del）伴随多个S蛋白突变，提示缺失突变可能协同促进免疫逃逸。

3. 核心启动子与X蛋白突变

基因型C中46.7%样本携带1762 A>T/1764G>A双突变（HCC风险标志），且与X蛋白K130M/V131I突变共现。相比之下，基因型B更易出现1752-1754位点突变（55.6%），导致X蛋白I127V/T/M变异，这些突变可能通过改变HBx蛋白转录激活功能影响疾病进程。

4. 前核区/核心蛋白突变谱

基因型B中1896G>A无义突变（eW28*）检出率达55.6%，该突变通过阻断HBeAg产生增强病毒复制，与FH发生密切相关。而基因型A则高频率出现1858T>C（71.4%），该位点可抑制1896突变的发生，解释了为何基因型A较少导致重症肝炎。

结论与意义

这项研究首次绘制了日本献血者群体HBV突变全景图，揭示三个关键流行病学特征：

1. 1.

   基因型B/C分别通过不同突变路径（1896无义突变 vs 1762/1764双突变）增加FH和HCC风险；

2. 2.

   免疫逃逸突变在无症状携带者中已广泛存在，且基因型间存在显著差异；

3. 3.

   基因型A特有的1858T>C突变可能起到"分子刹车"作用，延缓疾病进展。

这些发现为日本疫苗接种政策的动态调整提供了分子流行病学依据，强调需持续监测疫苗压力下的病毒进化趋势。特别是针对基因型C携带者，应加强1762/1764突变筛查以实现肝癌早期预警。该研究发表于《Scientific Reports》的发现，为全球HBV防控策略优化提供了重要范式。