综述：流式细胞术评估血小板表型、功能及细胞相互作用的优化与检测性能指南

这篇综述系统阐述了流式细胞术（Flow Cytometry）在血小板检测中的临床价值与技术要点，涵盖遗传性血小板疾病（inherited platelet disorders）、药物性血小板减少症（drug induced thrombocytopaenias）等应用场景，强调样本处理、缓冲液选择（Buffers）、仪器校准等关键环节对检测结果的影响，为临床病理学和血小板研究提供标准化操作框架。

　　

背景

血小板作为巨核细胞衍生的无核血细胞，传统认知中其功能集中于止血（hemostasis），通过血管损伤部位形成初级栓子阻止出血。近年研究发现，血小板还参与炎症反应、免疫调节和细胞间通讯。激活的血小板释放胞质颗粒，发生细胞骨架重构，并表达P-选择素（P-selectin）等黏附分子，这些特性使其成为流式细胞术分析的理想对象。

当前临床应用

临床流式检测聚焦于止血功能评估，但应用场景已扩展至诊断、治疗监测和输血医学领域。在遗传性血小板功能缺陷、自身免疫性血小板减少症（如ITP）、抗血小板药物疗效追踪（如阿司匹林或P2Y₁₂抑制剂）等场景中具有不可替代的价值。

关键性能考量

检测准确性依赖于前分析、分析和后分析阶段的全程控制：

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  前分析变量：枸橼酸钠抗凝全血（citrated whole blood）需轻柔处理以避免体外激活（in vitro activation），样本静置时间、离心速度均需标准化。

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  缓冲液选择：不同离子组成、渗透压和pH的缓冲液（如Tyrode's缓冲液）直接影响血小板钙信号（calcium signaling¹⁰）和抗原表位暴露。

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  仪器设置：低速进样（flow slowly triggering）结合血小板特异性标记（如CD41/CD61）可精准识别血小板亚群，尤其在血小板减少症样本中。

技术要点

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  标记策略：表面受体（如GPIIb/IIIa）、活化标志物（如P-selectin）和线粒体膜电位探针联用可评估血小板多参数功能。

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  质控要求：必须设置同型对照（isotype controls）、未刺激阴性对照和已知阳性样本。

总结与展望

流式细胞术为血小板研究提供了单细胞分辨率的技术优势，未来可探索血小板异质性（heterogeneity）与免疫微环境互作机制。标准化操作流程的建立将推动其在精准医疗中的更广泛应用。

（注：全文严格基于原文内容缩编，未添加非文献依据的结论）