樱桃红蟑螂抗菌肽果蝇霉素基因SlDros克隆及体内诱导表达

　　

摘要： 【目的】本研究旨在鉴定樱桃红蟑螂Shelfordella lateralis的抗菌肽果蝇霉素基因，并探究其发育和组织表达特性及其在细菌与杀虫剂诱导下的表达情况。【方法】基于樱桃红蟑螂转录组数据对樱桃红蟑螂的果蝇霉素基因进行鉴定，并通过RT-PCR进行验证；利用RT-qPCR测定樱桃红蟑螂不同发育阶段(1龄若虫、4龄若虫及6日龄雌成虫和雄成虫)、4龄若虫不同组织(头、胸、肠道、足、脂肪体、血淋巴和体壁)及注射大肠杆菌Escherichia coli、金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus和溴氰菊酯(1×^10-5 mg/L)后4龄若虫中果蝇霉素基因的表达量。【结果】克隆得到了樱桃红蟑螂果蝇霉素基因SlDros的cDNA序列(GenBank登录号: PQ464795)，其开放阅读框长201 bp，编码66个氨基酸。SlDros在樱桃红蟑螂6日龄雄成虫中大量表达；SlDros在4龄若虫头、体壁、胸和血淋巴中的表达量较高；注射大肠杆菌后12, 24和48 h时4龄若虫中SlDros的表达量显著高于对照组（注射蒸馏水）；注射金黄色葡萄球菌后6, 12, 24和72 h时4龄若虫中SlDros的表达量都显著高于对照组（注射蒸馏水）；注射溴氰菊酯96 h时4龄若虫中SlDros的表达量显著高于对照组（注射丙酮）。【结论】樱桃红蟑螂中存在抗菌肽果蝇霉素基因，并且细菌和杀虫剂胁迫均能诱导其表达。研究结果可为研究樱桃红蟑螂抗菌肽的功能及其进一步开发新型抗菌药物打下基础。