靶向ANXA8–SP1–PPA1轴调控TCA循环和基质沉积：弥漫型胃癌治疗新策略

本研究针对弥漫型胃癌（DGC）中异常细胞外基质（ECM）沉积和代谢重编程的调控机制，通过多组学分析发现ANXA8通过SP1-PPA1轴抑制三羧酸循环（TCA），激活癌症相关成纤维细胞（CAFs）并促进ECM沉积。研究人员筛选出小分子抑制剂UNC2025，联合纳米递送系统显著增强5-FU疗效，为DGC治疗提供新靶点和临床转化策略。

　　

弥漫型胃癌（DGC）是一种侵袭性强、预后极差的恶性肿瘤，其特征是致密的细胞外基质（ECM）沉积和显著的间质反应。这种独特的微环境不仅促进肿瘤进展，还导致化疗药物如5-氟尿嘧啶（5-FU）的疗效受限。尽管近年来免疫治疗和靶向治疗取得进展，但DGC患者的生存率仍不理想。究其原因，ECM异常沉积形成的物理屏障会阻碍药物渗透，同时代谢异常导致的能量供应失衡可能进一步加剧肿瘤恶性表型。然而，ECM沉积与代谢重编程之间的调控机制尚不明确，这成为改善DGC治疗的关键科学问题。

为破解这一难题，研究人员在《Research》发表的最新研究中，整合单细胞测序、蛋白质组学、代谢组学和大规模临床数据，发现DGC中存在显著的三羧酸循环（TCA cycle）抑制现象。通过多组学交叉分析，首次鉴定出膜联蛋白A8（ANXA8）是连接代谢异常与ECM沉积的核心调控因子。机制研究表明，ANXA8通过与转录因子SP1相互作用，促进焦磷酸酶1（PPA1）的转录，从而抑制TCA循环关键酶（如CS、IDH2和SDHA）的表达。这种代谢重编程导致乳酸堆积，激活CAFs并驱动胶原沉积，形成促肿瘤微环境。

研究采用的关键技术包括：15例DGC患者的配对组织膜蛋白质组学分析、261,807个单细胞的转录组测序、基于TCGA数据库的生存分析和LASSO回归建模、患者来源类器官（PDO）和小鼠移植瘤（PDX）模型验证，以及基于结构虚拟筛选的ANXA8抑制剂开发。

TCA循环抑制与异常ECM沉积相关

通过比较DGC组织和癌旁正常组织的蛋白质组学数据，发现TCA循环和氧化磷酸化通路显著下调。单细胞测序进一步证实上皮细胞中碳代谢通路受抑，而间质细胞中ECM受体相互作用通路激活。代谢组学显示TCA循环中间产物（柠檬酸、顺乌头酸等）在DGC细胞中减少，临床样本中TCA循环酶表达与胶原沉积呈负相关。

ANXA8是调控TCA抑制和ECM沉积的关键因子

多组学交叉分析锁定ANXA8为核心差异蛋白。生存分析显示高表达ANXA8患者预后更差，且与5-FU耐药显著相关。机制上，ANXA8缺失可恢复TCA循环活性，降低CAFs活化和胶原沉积。

ANXA8通过SP1-PPA1轴调控代谢与微环境

实验证实ANXA8与SP1结合促进PPA1启动子活性，PPA1敲除后TCA循环中间产物显著增加。临床样本中PPA1高表达与TCA循环酶低表达及高胶原沉积密切相关。

靶向ANXA8增强化疗敏感性

虚拟筛选发现MERTK/FLT3抑制剂UNC2025能特异性结合ANXA8（K_D=83.46 nmol/L），破坏ANXA8-SP1相互作用。在PDX模型中，UNC2025联合5-FU使小鼠中位生存期从47天延长至68天。

纳米递送系统提升治疗效能

开发的TA@UNC2025纳米颗粒具有pH响应特性，在酸性肿瘤微环境中释放率提升6倍。该纳米药物使PDX模型生存期进一步延长至96.6天，且显著降低游离药物的心脏毒性。

这项研究的重要意义在于：首次阐明ANXA8-SP1-PPA1轴通过代谢-微环境交叉调控促进DGC进展的分子机制；临床转化方面，发现UNC2025可重新激活TCA循环并逆转ECM屏障，其纳米制剂更展现出协同增效作用。该成果不仅为DGC的预后评估提供新标志物，更为克服化疗耐药提供了"代谢调控+纳米递药"的创新治疗策略。值得注意的是，ANXA8在多种实体瘤中高表达，因此该靶点的发现可能具有更广泛的肿瘤治疗指导价值。