ULK1调控单核细胞增生李斯特菌异源自噬清除中的细菌泛素化及p62招募机制

本研究揭示了ULK1（Unc-51-like kinase 1）在异源自噬（xenophagy）中的关键作用：通过调控单核细胞增生李斯特菌（L. monocytogenes）表面的泛素化修饰及自噬适配蛋白p62（S409位点磷酸化依赖）的招募，促进LC3+自噬体的形成，从而限制细菌胞内增殖。这一发现为感染性疾病治疗靶点开发提供了新思路。

　　

细胞自主防御的分子开关：ULK1如何启动异源自噬清除细菌

细胞自噬与病原体清除的精密调控

真核细胞通过自噬（autophagy）维持稳态，其中异源自噬（xenophagy）是清除胞内细菌（如单核细胞增生李斯特菌L. monocytogenes）的关键机制。该菌通过分泌李斯特菌溶血素O（LLO）逃逸吞噬体进入胞质，触发泛素化修饰和自噬适配蛋白p62的招募，最终被LC3⁺自噬体包裹降解。

ULK1：细菌泛素化的隐形指挥家

研究首次证实，ULK1缺失会导致L. monocytogenes表面泛素化水平降低70%（野生型细胞中50%细菌泛素化，ULK1敲除后仅27%），且p62招募减少50%。值得注意的是，这种缺陷具有ActA蛋白依赖性——缺失ActA的突变菌株（ΔactA）即使无ULK1仍能高效招募泛素和p62，暗示ActA可能干扰ULK1的定位或功能。

磷酸化密码：p62的S409位点决定细菌命运

深入机制研究发现，ULK1通过磷酸化p62第409位丝氨酸（S409）增强其泛素结合域（UBA）亲和力。表达磷酸化缺陷突变体p62 S409A的细胞中，p62对野生型L. monocytogenes的招募率从17%骤降至1%，自噬体形成减少，细菌存活率显著提升。这一发现将蛋白翻译后修饰与抗感染免疫直接关联。

时空动态的防御战役

时间进程分析显示，感染2小时是防御关键窗口期：此时20%的胞质细菌已与LC3共定位，泛素和p62标记率达65%。ULK1缺失或p62 S409A突变会延迟这一进程，导致4-8小时后细菌负荷增加。有趣的是，ULK1不影响细菌逃逸吞噬体的能力（通过phalloidin染色验证），专注调控逃逸后的清除阶段。

治疗靶点的转化潜力

该研究揭示了ULK1-p62轴的双重调控作用：既促进细菌泛素化"标签"的生成，又通过磷酸化增强p62的"抓取"能力。鉴于AMPK-ULK1通路可被小分子药物调控（如A771726），这一发现为开发抗胞内菌感染疗法提供了新靶点，特别是针对李斯特菌、结核分枝杆菌等依赖ActA免疫逃逸策略的病原体。

未解之谜与未来方向

研究遗留两个核心问题：ULK1如何特异性招募至细菌表面？ActA是否直接干扰ULK1功能？后续研究可通过蛋白质互作筛选和超高分辨率显微技术探索这些分子细节，进一步完善异源自噬的启动理论。