综述：急性髓系白血病中流式细胞术与分子学可测量残留病灶的现状：检测方法、临床应用与挑战

这篇综述系统阐述了急性髓系白血病（AML）可测量残留病灶（MRD）的三大检测技术——多参数流式细胞术（MFC）、聚合酶链反应（PCR）和新一代测序（NGS）的临床价值，重点探讨MRD在诱导治疗后缓解患者中的预后分层作用及其对异基因造血干细胞移植（alloHSCT）等巩固治疗决策的指导意义，同时指出当前标准化与多方法联用的挑战。

　　

Abstract

急性髓系白血病（AML）的可测量残留病灶（MRD）检测技术正在重塑临床决策体系。通过多参数流式细胞术（MFC）、定量PCR（qPCR）和错误校正型新一代测序（NGS）三大方法，MRD可突破诊断时分子风险分层的局限，在10^?2至10^?6的灵敏度范围内捕捉残留病变，为个体化治疗提供关键依据。

1. 引言

欧洲白血病网（ELN）风险分层虽能指导初始治疗，但无法动态评估疗效。MRD通过检测形态学缓解后残留的白血病细胞，成为预后评估的"黑匣子解码器"。MFC凭借90%的普适性和快速周转优势，与灵敏度达10^?6的qPCR（如NPM1突变检测）形成互补，而高敏感NGS则使FLT3-ITD等突变检测灵敏度突破至10^?6。

2. MRD的预后价值

2.1 MFC-MRD

HOVON/SAKK 42A等研究证实，≥0.1%的MRD阳性（MRDpos）使4年无复发生存（RFS）降低50%。值得注意的是，在ELN中危组中，MFC-MRD阴性（MRDneg）患者5年生存率可达78%，而阳性组仅35%。

2.2 qPCR-MRD

NPM1突变转录本在二次化疗后持续存在预示80%复发风险，而核心结合因子白血病（CBF-AML）中>3 log的转录本降幅使5年累积复发率（CIR）从42%降至15%。

2.3 NGS-MRD

FLT3-ITD变异等位基因频率（VAF）≥0%即预示移植后复发风险增加3倍，而IDH2突变持续存在者3年总生存（OS）仅40%。

3. MRD的临床应用

3.1 移植决策导航

NPM1 MRDpos患者接受alloHSCT后3年OS提升至65%，而MRDneg患者化疗即可达同等疗效。GIMEMA AML1310试验首次证实中危组MRDneg患者可安全豁免移植。

3.2 预处理强度调控

年轻FLT3-ITD MRDpos患者采用清髓性预处理（MAC）可使复发风险降低40%，但老年患者未见获益。

3.3 移植前干预

维奈托克联合阿扎胞苷方案使82% NPM1 MRDpos患者转阴，移植后19个月存活率达91%。

4. 挑战与突破

MFC面临血液稀释干扰（连续3次骨髓抽吸MRD阳性率递减50%），而LSC（白血病干细胞）检测技术正成为新星。qPCR存在26%实验室假阳性风险，ddPCR（数字微滴PCR）技术或将破解此困局。NGS的错误校正技术使FLT3-ITD检测下限突破至0.001%。

5. 讨论

MRD指导的精准治疗时代已至，但方法学异质性仍是"阿喀琉斯之踵"。未来需通过RESOLVE等跨国试验建立标准化路径，同时探索MFC与NGS的"双剑合璧"模式，让MRD真正成为AML治疗的指南针。