短时培养联合MALDI-TOF MS技术快速鉴定血培养中念珠菌属的性能评估

（编辑推荐）本研究通过对比短时培养法、商品化Sepsityper试剂盒和自建SDS裂解法三种方法，证实6小时短时培养联合MALDI-TOF MS技术对血培养中念珠菌属（Candida spp.）的鉴定率最高达71.9%，且可同步完成抗真菌药敏试验（AST），为临床缩短18小时检测窗口期，对侵袭性真菌感染的精准诊疗具有重要实践价值。

　　

研究背景

侵袭性念珠菌感染的流行病学正面临非白念珠菌（non-albicans Candida）比例上升和耐药率增长的双重挑战。真菌血症占血流感染（BSI）的9%，死亡率高达30%-50%。传统培养鉴定需时2-3天，而基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）虽能快速鉴定微生物，但血培养液中宿主蛋白干扰仍是技术难点。

材料与方法

研究纳入52株临床分离念珠菌（含白念珠菌、光滑念珠菌等8个种），模拟接种于BACT/ALERT FA Plus和BD BACTEC Mycosis-IC/F血培养瓶。对比三种方法：

1. 1.

   短时培养法：血培养液接种沙保弱琼脂（SDA）和显色平板，37°C培养6小时后直接进行MALDI-TOF MS检测；

2. 2.

   Sepsityper试剂盒：改良方案采用5 mL培养液离心，裂解缓冲液处理；

3. 3.

   自建SDS裂解法：0.1%十二烷基硫酸钠（SDS）双重裂解红细胞。

核心发现

鉴定率比较

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  总体鉴定率：短时培养法（71.9%）显著高于Sepsityper（59.6%）和自建法（57.3%）（p≤0.05）；

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  专用真菌培养瓶（Mycosis-IC/F）表现最佳：自建法达100%鉴定率，短时培养法76.7%；

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  未鉴定菌种：白念珠菌（C. albicans）在Sepsityper组漏检6株，短时培养仅漏检1株。

质谱评分与时效性

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  平均Log Score（LS）：自建法最高（1.97±0.19），短时培养法最低（1.83±0.19），但差异无临床意义；

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  检测时长：Sepsityper最快（90分钟），短时培养需6小时20分钟，但后者仅需5分钟手工操作。

抗真菌药敏验证

对10株菌的微量肉汤稀释法（Sensititre YeastOne）显示：短时培养法MIC值与标准培养结果仅相差1个稀释度，卡泊芬净（caspofungin）差异最大（1.2倍），分类符合率100%。

技术优势与局限

短时培养法通过18小时周期缩短（相比传统方法）和同步AST的优势，弥补了6小时孵育的时间成本。但研究存在模拟样本为主、罕见菌种未覆盖等局限。

临床价值

该方案为真菌血症的早期诊断提供"双快"路径：快速鉴定（6小时）结合快速药敏，尤其适用于耐药率攀升的临床现状。专用真菌培养瓶与短时培养的联用策略，可望成为实验室标准操作流程（SOP）的新选项。