邻苯二甲酸酯与转甲状腺素蛋白的分子互作机制：多光谱技术联合计算模拟揭示其内分泌干扰效应

本研究通过分子动力学(MD)模拟、量子化学计算与多光谱技术联用，系统揭示了环境污染物邻苯二甲酸酯(PAEs)及其代谢物与甲状腺激素转运蛋白(TTR)的高亲和力结合机制。荧光滴定显示PAEs-TTR复合物结合常数达6×106 mol L-1，FRET证实5.5±0.2 nm能量转移距离，MD模拟阐明其通过氢键和范德华力竞争性取代甲状腺激素T4，为环境内分泌干扰物(EDCs)的毒性评估提供了量化框架。

　　

本研究通过温度依赖性荧光猝灭分析表征TTR-PAEs结合机制

荧光猝灭实验是快速表征TTR与PAEs结合机制的有效方法。通过分析猝灭常数(K_sv)与温度的关系可判定作用机制：K_sv与温度呈线性关系提示动态猝灭或静态猝灭机制，而非线性关系则暗示更复杂的相互作用模式。

本文通过计算模拟与多光谱联用技术，系统研究了PAEs及其代谢物与人TTR的分子互作。稳态荧光与FRET测定显示PAEs通过基态复合物形成引发TTR色氨酸荧光静态猝灭，定量分析揭示其具有单高亲和力结合位点，平衡结合常数(K_a)达1×10⁶至6×10⁶ mol L^-1。红外光谱与三维荧光证实PAEs结合导致TTR二级结构显著改变，MD模拟显示结合后氨基酸残基柔性增加。量子化学分析指出氢键和范德华力是主要相互作用力，这些发现为环境PAEs通过"特洛伊木马"机制跨越血脑屏障和胎盘屏障的发育毒性提供了分子基础。