综述：西藏绵羊羔羊痢疾相关产气荚膜梭菌的毒素分型与生物学特性鉴定

（编辑推荐）本研究首次从西藏山南地区分离鉴定出产气荚膜梭菌B型（CpB），通过毒素基因检测（cpa/cpb/etx+）、生化特性分析和药敏试验，揭示其对磺胺嘧啶、诺氟沙星等高度敏感，为高原羔羊痢疾防控提供了重要科学依据。

　　

生长特性与形态观察

在TSC琼脂平板上，分离菌株形成典型黑色圆形菌落，革兰染色显示短粗钝端的革兰阳性杆菌，符合产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens, Cp）形态特征。电镜观察可见卵圆形芽孢导致菌体梭形膨大。

分子生物学鉴定

16S rRNA基因测序显示该菌株与NCBI数据库中Cp参考序列相似度>99%。多重PCR检测到α毒素（cpa，324bp）、β毒素（cpb，196bp）和ε毒素（etx，656bp）基因，未检出iap、cpe和netB基因，确认为CpB型。β毒素（Cpb）通过结合宿主细胞表面受体形成跨膜孔道，破坏肠道上皮紧密连接，导致出血性坏死性肠炎。

生化特性分析

生化试验显示该菌株能发酵葡萄糖、乳糖和麦芽糖，水解明胶，具有氧化酶活性和硝酸盐还原能力，但尿素水解阴性。这些特性与Cp标准株一致，尤其H₂S产生和鸟氨酸脱羧酶阳性可作为鉴别标志。

抗生素敏感性

Kirby-Bauer法显示菌株对磺胺嘧啶（抑菌圈≥17mm）、诺氟沙星、呋喃妥因和头孢唑林高度敏感，但对阿莫西林、苯唑西林、羧苄西林和四环素耐药。耐药基因筛查仅检出aac(6′)-Ib-cr，该基因介导对氨基糖苷类和喹诺酮类的交叉耐药。

流行病学意义

西藏高原此前未见CpB致羔羊痢疾的报道。该病在未免疫羊群中死亡率可达50-90%，3-5日龄羔羊占病例70%以上。研究建议采用"免疫+管理+治疗"三位一体防控策略，优先选用敏感抗生素，并加强牧场消毒和母羊乳源防护。

研究创新点

首次明确CpB在西藏山南羔羊痢疾暴发中的病原学地位，揭示其毒素谱和耐药特征，为制定区域性防控方案提供数据支撑。未来需结合分子流行病学监测，开发针对β毒素的亚单位疫苗或单抗制剂。