铁皮石斛多糖(DOP)靶向治疗T细胞急性淋巴细胞白血病(T-ALL)的多组学机制研究：网络药理学、生物信息学与实验验证

本研究创新性地结合网络药理学(NP)、生物信息学分析和实验验证，首次系统揭示铁皮石斛多糖(DOP)通过调控CARD11/CCND1等13个核心靶点，经PI3K-AKT/NF-κB信号通路诱导Jurkat细胞S期阻滞和凋亡的抗T-ALL作用机制，为天然多糖类药物开发提供新思路。

　　

Highlight

材料与试剂

实验所用铁皮石斛采自中国四川省乐山市，每年11月至次年3月采收。关键抗体包括Santa Cruz或Cell Signaling Technology公司提供的β-肌动蛋白、CARD11、细胞周期蛋白D1(CCND1)、PDGFB、BCL2家族蛋白(BCL-XL/BAX)、RB1、IL6ST、NF-κB(P65)及其磷酸化形式、PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白等。采用QIAGEN cDNA合成试剂盒和SYBR Green RT-PCR试剂盒进行基因表达分析。

DOP的提取与纯化

从铁皮石斛茎部提取的多糖总糖含量达55.6±2.03%，蛋白质和核酸含量分别低至1.33±0.004%和0.08±0.017%。紫外光谱在260/280 nm处吸收峰微弱（图1a），证实通过本方案成功去除了蛋白质和色素等杂质。

结论

我们从铁皮石斛茎部分离得到均质DOP，鉴定其单糖组成以1,4,5-三-O-乙酰基-2,3,6-三-O-甲基甘露醇(4-Man(p),61.74%)和1,4,5-三-O-乙酰基-2,3,6-三-O-甲基葡萄糖醇(4-Glc(p),28.78%)为主。实验浓度DOP对间充质干细胞(MSCs)未显示明显毒副作用。通过整合网络药理学(NP)、生物信息学分析和分子对接技术...