髓源性抑制细胞耗竭缓解小鼠膜性肾病肾损伤的机制研究

本研究通过建立原发性膜性肾病(PMN)小鼠模型，首次揭示了髓源性抑制细胞(MDSCs)通过调控Th17/Th2免疫应答促进疾病进展的机制。采用吉西他滨(GEM)耗竭MDSCs后，模型小鼠肾脏病理损伤显著改善，Th1/Treg细胞比例回升，为PMN的免疫治疗提供了新靶点。

　　

1 引言

原发性膜性肾病(PMN)是成人特发性肾病综合征的主要病因，约85%病例由抗PLA2R抗体介导。尽管激光显微切割质谱技术已鉴定出新型抗原如exotosin 1/2等，但PMN的发病机制仍不完全清楚。髓源性抑制细胞(MDSCs)作为骨髓来源的异质性细胞群，在系统性红斑狼疮(SLE)和类风湿关节炎(RA)等自身免疫疾病中发挥重要作用。前期临床研究发现PMN患者外周血MDSCs显著增加，与Th17反应增强呈正相关，但缺乏动物模型验证。

2 材料与方法

采用DBA/1小鼠建立rh-α3NC1诱导的PMN模型，通过流式细胞术动态监测MDSCs(CD11b⁺Gr-1⁺)及其亚群G-MDSC(CD11b⁺Ly6G⁺)、M-MDSC(CD11b⁺Ly6C⁺)比例变化。吉西他滨(100mg/kg)在二次免疫后第4/7/10/13天腹腔注射耗竭MDSCs。通过尿白蛋白/肌酐比值(ACR)、血浆尿素检测肾功能，结合HE/PAS染色和电镜评估肾组织病理。

3 结果

3.1 MDSCs扩增与疾病进展正相关

模型组外周血MDSCs比例从免疫后3周开始显著增加(较CFA组p<0.0001)，其中G-MDSC增幅更明显(p=0.0021)，而M-MDSC无统计学差异。脾脏组织检测显示相同趋势。

3.2 Th17/Th2应答增强

模型组CD4⁺IL-17A⁺ Th17细胞比例在免疫4周后升高3倍(p=0.0003)，脾脏IL-17A mRNA表达增加7倍(p=0.003)。Th2细胞(CD4⁺IL-13⁺)及其转录因子GATA3同步上调(p=0.0127)。

3.3 Th1/Treg应答受抑

随着病程进展，IFN-γ⁺ Th1细胞持续减少(p<0.0001)，Treg细胞比例在15周时降低40%(p=0.0015)，呈现典型的免疫失衡状态。

3.4 吉西他滨治疗显著改善病理

MDSCs耗竭后，模型小鼠尿ACR下降60%(p<0.0001)，电镜显示肾小球基底膜电子致密沉积物消失。免疫荧光检测IgG沉积强度降低80%(p<0.0001)。

3.5 免疫格局重塑

治疗组Th17相关因子RORγt表达减少90%(p=0.0007)，而Treg比例回升至正常水平(p=0.0002)，证实MDSCs通过调控T细胞亚群分化影响疾病进程。

4 讨论

本研究首次在动物模型中证实MDSCs通过"Th17/Th2上调-Th1/Treg下调"的双向调控网络促进PMN进展。吉西他滨通过特异性耗竭G-MDSC发挥治疗作用，其诱导的Treg短暂升高可能是机体对抗过度免疫的负反馈调节。该发现为PMN的免疫干预提供了新思路，未来需进一步探索MDSCs与Treg的功能互作机制。