Src激酶通过RAF/MEK/ERK通路调控中性粒细胞胞外诱捕网生成以缓解急性器官损伤的机制研究

这篇研究揭示了Src激酶在急性炎症损伤中的关键作用：通过磷酸化RAF1（Ser 621位点）激活RAF/MEK/ERK信号通路，促进活性氧（ROS）生成和中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）形成，进而加剧急性胰腺炎（AP）和脓毒症（sepsis）的器官损伤。研究通过基因敲除（S100a8cre Srcfl/fl小鼠）和药物抑制（tirbanibulin等）证实靶向Src可显著减少NETs释放并改善预后，为临床治疗提供了新策略。

　　

引言

急性炎症失控导致的多器官衰竭是临床死亡的主因之一，而中性粒细胞作为先天免疫的核心效应细胞，其过度激活释放的中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）在急性胰腺炎（AP）、脓毒症等疾病中加剧组织损伤。尽管已有研究提出靶向肽酰精氨酸脱亚胺酶4（PAD4）或DNA酶I降解NETs的策略，但临床转化仍受限。本研究聚焦原癌基因酪氨酸激酶Src，探索其在NETs形成中的作用机制及治疗潜力。

Src在NETs形成中的关键作用

体外实验显示，佛波酯（PMA）诱导的NETs模型中，Src磷酸化（p-Src）水平显著升高。通过构建中性粒细胞特异性Src敲除小鼠（S100a8^cre Src^fl/fl），发现其NETs生成减少，且炎症因子（IL-6、TNF-α）释放降低。药物抑制（如tirbanibulin）同样有效阻断NETs形成，证实Src是NETs生成的必需调控因子。

体内模型验证

在AP（cerulein诱导）和脓毒症（CLP手术）小鼠模型中，Src缺陷显著减轻胰腺和肺组织病理损伤，降低血清淀粉酶、脂酶及炎症标志物水平。免疫荧光显示损伤组织中NETs沉积减少，脓毒症模型生存率提高。临床数据分析进一步表明，AP和脓毒症患者外周血中性粒细胞的p-Src水平与疾病严重程度正相关，且与NETs标志物（MPO-DNA复合物、dsDNA）呈显著相关性。

分子机制解析

RNA测序和通路富集分析揭示，Src通过RAF/MEK/ERK信号轴调控ROS生成。Co-IP和质谱证实p-Src直接磷酸化RAF1的Ser 621位点，而RAF抑制剂（GW5074）与Src抑制剂联用未产生协同效应，提示二者作用于同一通路。此外，Src还通过激活蛋白激酶C（PKC）间接调控RAF/MEK/ERK，形成双通路强化ROS-NETs级联反应。

治疗转化潜力

三种Src抑制剂（tirbanibulin、bosutinib、dasatinib）在动物模型中均表现出显著疗效：减少NETs释放、改善器官功能并提高生存率。尤其tirbanibulin在非感染性（AP）和感染性（脓毒症）模型中均能降低炎症因子水平，凸显其广谱治疗潜力。

总结

该研究阐明Src通过双重通路（RAF1-Ser 621磷酸化和PKC激活）驱动NETs依赖性器官损伤，其抑制剂可有效阻断这一过程。临床数据支持p-Src作为预后标志物的价值，为急性炎症疾病的靶向治疗提供了理论依据和转化方向。