叶酸修饰脂质体共递送五味子甲素与奥沙利铂协同增强结直肠癌细胞免疫原性死亡的机制研究

本研究针对结直肠癌(CRC)免疫治疗中免疫原性不足的难题，创新性地构建了pH敏感的叶酸受体靶向脂质体(FOS-lip)，共载化疗药物奥沙利铂(OXP)和天然活性成分五味子甲素(SCHA)。通过增强活性氧(ROS)介导的内质网应激，显著提升免疫原性细胞死亡(ICD)效应，促进损伤相关分子模式(DAMPs)释放和树突状细胞(DCs)成熟，为CRC免疫联合治疗提供了新策略。

　　

在肿瘤免疫治疗蓬勃发展的今天，结直肠癌却因其"冷肿瘤"特性成为难以攻克的堡垒——免疫细胞浸润不足、免疫检查点抑制剂响应率低下。这背后隐藏着关键科学问题：如何唤醒肿瘤的免疫原性？传统化疗药物奥沙利铂(OXP)虽能诱导免疫原性细胞死亡(ICD)，但其产生的活性氧(ROS)易被降解，导致内质网应激不足。来自黑龙江中医药大学的Bo Zhou团队另辟蹊径，将目光投向中药五味子中的活性成分五味子甲素(SCHA)，它不仅能增强OXP的ROS效应，还能通过内质网应激关键蛋白CHOP通路协同促进ICD。这项发表于《Discover Oncology》的研究，通过精巧的纳米递送系统设计，为破解CRC免疫治疗困境提供了新思路。

研究团队采用三大关键技术：1) pH敏感脂质体制备技术，以胆固醇半琥珀酸酯(CHES)构建酸响应载体；2) 叶酸(FA)受体介导的主动靶向递送，利用DSPE-PEG₂₀₀₀-FA修饰增强肿瘤蓄积；3) 多模式免疫效应评价体系，通过流式细胞术检测钙网蛋白(CRT)暴露，ELISA分析高迁移率族蛋白B1(HMGB1)释放，以及DCs成熟度评估。

【结果与发现】

4.1 载体表征：FOS-lip呈现155±0.26 nm的均匀粒径，正电位(+17.25 mV)促进细胞摄取，在pH 5.5条件下12小时内药物释放超80%。

4.2 协同杀伤：FOS-lip使OXP和SCHA的半数抑制浓度(IC₅₀)分别降至15.65 ng/mL和3.49 μg/mL，联合指数(CI)最低达0.62，显著优于游离药物组合(p<0.01)。

4.6 靶向递送：叶酸修饰使荧光标记脂质体(FC6-lip)的细胞摄取强度提升3倍，证实其高效靶向性。

4.7-4.8 ICD诱导：FOS-lip处理组ROS水平较单药提升2.1倍，DAMPs释放量创纪录——ATP达对照组的4.3倍，HMGB1释放量提升58%，CRT膜暴露荧光强度增加3.8倍(p<0.001)，最终使DCs成熟率突破性达到47.2%。

这项研究开创性地将传统中药活性成分与现代纳米技术相结合，突破了三重技术壁垒：1) 通过CHES的质子化特性实现溶酶体逃逸，解决胞内释放难题；2) 利用SCHA激活CHOP通路弥补OXP的ER应激不足；3) 借助FA受体介导的靶向递送提升肿瘤蓄积。实验数据表明，FOS-lip不仅能协同增强细胞毒性，更重要的是通过DAMPs的级联释放重塑肿瘤免疫微环境，为CRC免疫治疗提供了理想的"免疫原性增强剂"。这种"化疗-免疫"双效协同的策略，为开发其他"冷肿瘤"的免疫联合治疗方案提供了范式参考。