基于肿瘤特异性突变的ddPCR技术实现上皮性卵巢癌个体化治疗监测

本研究针对上皮性卵巢癌(EOC)ctDNA检测的临床挑战，通过靶向NGS panel鉴定肿瘤突变谱，开发个性化ddPCR监测平台。结果显示该方法可灵敏追踪TP53/PIK3CA/PTEN等突变，较CA-125更早预测复发，为EOC精准治疗提供新型分子监测工具。

　　

上皮性卵巢癌(EOC)作为致死率最高的妇科恶性肿瘤，约80%晚期患者面临复发困境。当前临床依赖的CA-125标志物存在灵敏度波动大（62-94%）、无法早期预警等局限，而循环肿瘤DNA(ctDNA)虽具潜力，却因EOC的高度异质性（如TP53突变位点分散、非TP53突变多样性）面临检测难题。这项由韩国首尔峨山医学中心团队开展的研究，创新性地将靶向NGS与液滴数字PCR(ddPCR)技术结合，为破解EOC个体化监测难题提供了新范式。

研究采用三大关键技术：1）基于383基因的OncoPanel AMC v3靶向测序分析13例EOC患者FFPE组织样本；2）针对TP53/PIK3CA等14个突变设计特异性ddPCR探针，建立突变特异性检测阈值（LOB法）；3）纵向监测术前至化疗期间血浆ctDNA动态，并与CA-125及CT影像进行关联分析。

【患者特征与突变谱】

13例患者包含10例高级别浆液性癌(HGSOC)、2例混合型及1例透明细胞癌。NGS揭示TP53突变见于所有HGSOC病例，而PTEN E91*/KRAS G12D等突变见于其他亚型，证实EOC突变的高度异质性。

【ddPCR性能验证】

成功优化10/14个突变的检测体系，灵敏度达1%突变频率。建立基于阴性人群的突变特异性cutoff值（中位数+2SD），如TP53 C238G cutoff为0.058% FA（片段丰度）。

【临床监测效能】

在7例患者中检出8种突变ctDNA：

• •

  S01病例TP53 C238G突变水平与CA-125同步下降，术后持续阴性；

• •

  S18病例PIK3CA H1047R ctDNA术前阳性而CA-125正常，凸显分子检测优势；

• •

  S17复发时PTEN E91* ctDNA阳性早于CA-125异常，提示早期预警价值；

• •

  TP53 Y236C/R273C等突变动态与治疗响应高度一致。

值得注意的是，2例TP53突变（E294*/Y220C）未检出ctDNA，可能与突变克隆占比或检测灵敏度相关。

该研究突破性证实：针对EOC个体化突变谱设计的ddPCR监测体系，较传统标志物具有更高时空分辨率。特别在CA-125不敏感亚型（如透明细胞癌）和早期复发监测中展现独特价值。尽管存在小样本局限，这种"NGS导航+ddPCR追踪"的双轨策略，为实现EOC精准动态监测提供了高性价比解决方案。未来扩大突变覆盖panel、优化低频突变捕获技术，将进一步推动液体活检在妇科肿瘤管理的临床转化。