双特异性抗CD19/CD20抗体HB2198通过双Fc结构域增强效应功能并持久清除体内记忆B细胞

本研究针对B细胞耗竭疗法在自身免疫疾病和血液恶性肿瘤中存在的临床需求，开发了新型双特异性抗体HB2198。该抗体通过GEM-DIMERTM技术整合抗CD19（huFMC63）和抗CD20（利妥昔单抗）的Fab结构域，并采用双Fc结构域增强FcyR结合能力。体外实验证实HB2198具有更强的ADCC、ADCP、CDC及直接杀伤活性，食蟹猴模型中单次给药即可实现>99%循环B细胞清除，并能持久重塑B细胞区室。该研究为需要同时靶向CD19+/CD20+细胞的疾病提供了更优治疗选择。

　　

在免疫系统疾病和血液肿瘤治疗领域，B细胞耗竭疗法已成为重要手段。然而现有单靶点药物如抗CD20的利妥昔单抗（rituximab）和抗CD19的tafasitamab存在局限性：无法同时清除CD19⁺浆母细胞和CD20⁺B细胞，且效应功能有待提升。更棘手的是，记忆B细胞（memory B cells）的持续存在与疾病复发密切相关。临床研究显示，靶向多抗原的CAR-T细胞疗法虽效果显著，但存在制备复杂、成本高昂等问题。这些痛点促使Gavin Lewis团队开发新一代双靶点抗体药物。

研究人员采用GEM-DIMER^TM技术构建了HB2198——一种结构创新的双特异性抗体。该技术通过ACE2受体的collectrin-like结构域实现抗体重链"超二聚化"，使HB2198同时具备：1）抗CD19（huFMC63）和抗CD20（rituximab）的Fab结构域；2）两个经S239D/I332E（SD/IE）突变增强的Fc结构域；3）通过静电导向确保正确链配对。研究通过SPR（表面等离子共振）和BLI（生物层干涉术）分析靶标结合特性，采用流式细胞术评估体外B细胞清除效率，并建立食蟹猴模型验证体内药效。

Structure and expression of HB2198

HB2198的独特结构使其能双价结合CD19和CD20抗原。稳定性实验显示，该抗体在37℃血清中保持两周稳定。

HB2198 demonstrates potent binding to both CD19 and CD20

SPR检测显示其对人类CD19和CD20的K_D分别为1.5 nM和0.20 nM。在CD19敲除（KO）和CD20 KO的Raji细胞系中，HB2198仍能通过剩余靶标有效结合，而对照抗体仅能结合单一靶标。

HB2198 demonstrates strongly enhanced bivalent binding to Fcy receptors

BLI实验揭示其FcyR结合优势：与rituximab相比，对CD16a_V158、CD32a_H131等受体的结合亲和力提升>1000倍，显著优于tafasitamab（仅提升28-97倍）。

HB2198介导高效B细胞清除

在健康人和SLE患者全血培养中，HB2198的EC₅₀达3.9 nM，最大清除率超越对照抗体。机制研究表明：

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  ADCC活性：在Raji细胞系中，即使存在竞争性IgG仍保持高效杀伤

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  ADCP作用：10 mg/mL人IgG存在时，巨噬细胞对靶细胞的吞噬率仍达90%

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  CDC效应：在SU-DHL-4细胞系中诱导补体依赖性细胞毒性与rituximab相当

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  直接杀伤：通过Annexin V/TO-PRO-3染色证实其诱导凋亡能力

食蟹猴模型验证

单次给药（5 mg/kg）3天内实现99.9%循环B细胞清除，记忆B细胞（CD27⁺）比例在6个月随访期持续低于基线50%。双剂量组（25 mg/kg×2）显示更持久的组织B细胞耗竭。

这项研究开创性地证明：通过双Fc结构域设计可突破传统抗体效应功能限制。HB2198的"一箭双雕"策略——同时靶向CD19/CD20并增强FcyR结合，为B细胞相关疾病提供了全新解决方案。特别是在SLE等自身免疫病中，其持久清除记忆B细胞的能力可能延缓复发。该成果发表于《Scientific Reports》，为开发下一代多功能抗体药物树立了技术标杆。未来研究可进一步探索其在淋巴组织中的渗透性，以及与现有疗法的联合应用潜力。