PB2-627V突变增强禽流感病毒跨宿主传播风险：突破ANP32宿主限制的双重适应性机制

（编辑推荐）本研究首次系统揭示禽流感病毒(AIV)PB2-627V突变通过协同利用禽类与人类ANP32A蛋白，赋予病毒在禽类和哺乳动物宿主的双重适应能力。该变异在H9N2/H7N9/H3N8等多亚型中稳定存在，可促进雪貂气溶胶传播，为AIV跨种传播提供了新型分子标记。

　　

PB2-627V突变在禽流感病毒中的流行病学特征

通过对全球42,297条PB2基因序列的分析，研究发现PB2-627V变异在2010年代后呈现爆发式增长，主要分布于中国（61.7%）及中东、欧洲等地。该变异在H9N2（64.5%）、H7N9（9.9%）和H5N6（9.1%）等亚型中高频出现，甚至在2.3.4.4b分支H5N1病毒中也有检出。系统发育分析显示，PB2-627V已形成独立进化簇，在人类分离株中出现频率显著高于禽类宿主。

分子机制：双重宿主适应的结构基础

冷冻电镜结构解析表明，PB2-627V通过改变蛋白表面电荷分布，部分逆转了PB2-627E的负电特性。这种中性氨基酸变异使病毒聚合酶能同时结合禽类ANP32A（chANP32A）和人类ANP32A（huANP32A）：

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  在鸡源DF-1细胞中，PB2-627V的聚合酶活性与野生型PB2-627E相当

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  在人源293T细胞中，其活性提升11.8-23.6倍，接近PB2-627K水平

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  ANP32双敲除（DKO）细胞实验证实，PB2-627V可特异性利用chANP32A和huANP32B

跨物种感染能力的实验验证

采用反向遗传学构建的H9N2^627V病毒展现出独特的宿主适应性：

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  禽类模型：在SPF鸡中，病毒载量（10^6.8 EID₅₀/mL）显著高于PB2-627K变异体，肺组织NP蛋白阳性细胞增加3倍

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  哺乳动物模型：

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    小鼠肺部病毒滴度达10^5.5 TCID₅₀/g，与PB2-627K相当

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    雪貂接触传播率100%，气溶胶传播延迟2天但效率相当

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  遗传稳定性：连续鸡群传代5代后，iSNV频率保持稳定（0.012%），未出现适应性突变

多亚型普适性研究

在H7N9和H3N8病毒背景下的实验显示：

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  PB2-627V维持了禽类宿主的复制效能（鸡肺病毒载量10^7.2 EID₅₀/g）

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  显著增强哺乳动物感染性：小鼠肺组织病理评分提升2级，病毒载量增加100倍

公共卫生意义与监测建议

该研究首次提出PB2-627V作为AIV zoonotic risk的新型分子标记：

1. 1.

   突破ANP32宿主限制的"通用钥匙"机制

2. 2.

   在禽类种群中的持续流行特性

3. 3.

   多亚型（包括高致病性H5N1）的跨宿主传播潜力

   建议将PB2-627V纳入全球流感监测网络的核心预警指标，特别是对H9N2内部基因供体病毒的监测。