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蓝莓病原真菌Diaporthe vaccinii Shear全基因组测序揭示其致病分子机制
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年08月28日 来源:Microbiology Resource Announcements 0.6
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来自国内的研究人员通过结合牛津纳米孔(ONT)和Illumina测序技术,完成了蓝莓致病真菌Diaporthe vaccinii CBS 118571菌株的高质量基因组组装。该研究获得60.2 Mb的杂交基因组(64条contigs,GC含量48.3%),BUSCO评估显示99.3%的真菌保守基因完整,为解析其引发枝枯病、茎溃疡等坏死性病害的分子机制奠定基础。
科研团队对蓝莓产业重大病原真菌——Diaporthe vaccinii Shear(菌株CBS 118571)展开基因组解密。该菌株分离自美国密歇根州蓝莓(Vaccinium corymbosum),能引发枝枯病、茎溃疡、叶萎黄及采后果实腐烂等系列坏死性病害(necrotrophic pathogenesis)。
为攻克长片段重复序列组装难题,研究者创新采用牛津纳米孔(ONT)长读长(平均15,336 bp,N50 24,998 bp)与Illumina短读长(PE150/PE250)的杂交策略。通过机械破碎(Covaris g-Tube)和末端修复(NEBNext系列试剂)构建ONT文库,配合PromethION P48平台测序;同时利用NEBNext dsDNA Fragmentase制备Illumina文库,在NovaSeq 6000上完成245.8X深度覆盖。
基因组拼图游戏由MaSuRCA v3.3.7软件主导,最终呈现60.19 Mb的精妙图谱——64条contigs宛如64块拼图,其中最大片段达4.44 Mb,N50高达1.70 Mb。质量评估显示:Illumina读段比对率97.99%,ONT读段比对率89.92%,BUSCO真菌核心基因集完整度达99.3%(单拷贝98.9%+重复拷贝0.4%)。
这张基因组藏宝图还透露关键线索:48.3%的GC含量、10.14%的重复序列,以及仅0.08%的杂合率。配套产生的8.25 Gb RNA-seq数据(137.1X)更如同解密手册,为后续注释致病相关基因(如细胞壁降解酶、效应蛋白编码基因)提供重要路标。
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