综述：新生犊牛腹泻致病性疾病的诊断研究进展

这篇综述系统总结了新生犊牛腹泻的病原学特征及诊断技术进展，重点阐述了病毒（BRV-A/BCoV/BNoV）、细菌（E. coli K99/Salmonella/C. perfringens）和寄生虫（C. parvum）等混合感染的检测策略，比较了传统培养法、免疫检测（ELISA/ICG）与分子诊断（PCR/LAMP/dPCR）的优劣，为临床快速诊断提供了技术路线优化方案。

　　

背景

新生犊牛腹泻是畜牧业最具经济破坏力的健康问题之一，1月龄内犊牛病死率高达57%。混合感染是主要特征，其中隐孢子虫（C. parvum）和牛A型轮状病毒（BRV-A）检出率分别达33.7%和27.1%，且与腹泻严重程度显著相关（OR值分别为173和79.9）。

临床诊断要点

病史采集需关注疫苗接种、初乳摄入和发病周龄——例如产肠毒素性大肠杆菌（ETEC）K⁹⁹多发于7日龄内，而隐孢子虫感染高峰在1-4周龄。

脱水评估分为四级：

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  轻度（6-8%）：眼窝轻微凹陷，皮肤回弹延迟2-4秒

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  重度（>12%）：眼球深陷，皮肤持续褶皱，休克症状

实验室诊断技术

细菌培养仍是金标准，但耗时长（如沙门氏菌ISO检测需5天）。埃及研究显示，腹泻犊牛粪便中大肠杆菌（35.99%）和沙门氏菌（24.72%）占比最高，其中S. Enteritidis和S. Typhimurium占血清型的91.3%。

免疫检测突破明显：

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  ELISA对轮状病毒灵敏度达100%，但受母源抗体干扰

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  免疫层析试纸（ICG）可在15分钟内检出C. parvum，与PCR符合率达92.7%

分子诊断呈现技术迭代：

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  多重qPCR（Enterit4Calves）可同步检测8种病原，效率达84-103%

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  微滴数字PCR（ddPCR）对BCoV检测限低至1拷贝/μL，较qPCR灵敏度提升10倍

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  LAMP法无需复杂设备，对隐孢子虫检测灵敏度100%，肉眼即可判读

新兴技术

纳米传感器通过金纳米颗粒显色反应，可检出670个/μL的隐孢子虫卵囊；电化学生物传感器对E. coli O157:H7的检测限比传统方法低3个数量级。

病理特征

C. perfringens感染可导致犊牛真胃多发性溃疡（见图2），而ETEC K⁹⁹则引发螺旋结肠膨满（见图3）。尸检需在死亡5分钟内进行以避免自溶干扰。

结论

现阶段推荐"ICG初筛+分子确认"的联合诊断策略，其中LAMP和ddPCR特别适合资源有限牧场。未来纳米传感器与微流控芯片的整合，有望实现现场10分钟内多病原同步检测的技术突破。