灵桂方通过LRP6/GSK3β/Septin4通路调控精浆外泌体Wnt信号改善弱精子症的研究

本文推荐：本研究首次揭示补肾中药灵桂方（LG）通过调控精浆外泌体（sEVs）介导的Wnt信号通路改善弱精子症（AS）的分子机制。实验证实LG通过激活精子LRP6磷酸化（p-LRP6）、抑制GSK3β磷酸化活性（p-GSK3β）并促进Septin4蛋白聚合，显著提升精子活力。该发现为男性不育治疗提供了新靶点。

　　

Highlight

本研究首次系统阐释了补肾中药通过外泌体调控精子功能的新机制，为传统医学现代化研究提供范式。

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试剂、抗体与仪器

灵桂方（LG）由淫羊藿（10g）、当归（15g）、地黄（10g）等14味中药组成。采用超速离心法分离精浆外泌体（sEVs），使用纳米颗粒追踪分析（NTA）和Western blot进行鉴定。主要抗体包括抗Wnt2b、Wnt10a、LRP6、磷酸化GSK3β（p-GSK3β^Ser9）及Septin4等。

精浆外泌体的提取与鉴定

临床样本分析显示，健康组（HS）与弱精症组（AS）的前向运动精子率（PR）存在显著差异（P<0.05），而经LG治疗的AS组（AS-LG）精子活力明显改善。透射电镜显示sEVs呈典型杯状结构，直径30-150nm，标志蛋白CD9/CD63阳性。

Discussion

全球男性生育力下降背景下，本研究创新性发现：① 生殖系统不同部位（附睾、前列腺、睾丸）分泌的sEVs携带特异性Wnt配体（如Wnt2b/10a）；② LG通过调控sEVs-Wnt信号激活精子LRP6/GSK3β/Septin4通路，这为"肾主生殖"理论提供了现代生物学依据。

Conclusion

体内外实验证实，LG通过多器官协同调控sEVs-Wnt信号网络，最终改善精子运动功能。该研究为开发基于外泌体的男性不育诊疗策略奠定基础。