D3 Array Combined技术结合富集步骤检测干制大麻花中多重病原体的性能验证研究

为解决干制大麻花（THC>0.3%）中Aspergillus属真菌、Salmonella及产志贺毒素大肠杆菌（STEC）的快速检测难题，研究人员开发了基于核酸提取、预扩增、位点特异性PCR和DNA微阵列杂交的D3 Array Combined方法。验证显示该方法在0-24小时富集时间内与培养法结果无统计学差异（95%置信区间），检测灵敏度高且将传统2-7天的周期缩短至数小时，为各州大麻检测法规提供了灵活合规方案。

　　

这项研究对升级版的D³ Array Combined检测系统（原DetectX Combined）进行了全面验证，该系统采用创新的分子生物学联用技术，通过以下流程实现病原体筛查：首先从大麻基质中提取核酸，经过预扩增（preamplification）和特异性位点聚合酶链式反应（Loci PCR），再通过标记PCR（Labeling PCR）生成荧光标记产物，最终与DNA微阵列杂交。

针对Aspergillus属四大致病菌（黄曲霉A. flavus、烟曲霉A. fumigatus、黑曲霉A. niger、土曲霉A. terreus）、沙门氏菌（Salmonella spp.）及产志贺毒素大肠杆菌（STEC）的多血清型检测，研究团队特别优化了活/死菌富集（LDE）试剂方案，允许0/2/24小时三档富集时间选择。

验证严格遵循AOAC微生物指南和标准方法性能要求（SMPRs? 2019.001/2020.02/2020.012），采用概率检测模型（POD）进行统计分析。数据显示：在所有污染浓度和富集时间点，该方法的初筛结果与培养确认结果在95%和90%置信区间内均无显著差异。

该技术的突出优势在于：相较传统qPCR或培养法（需2-7天），能在数小时内完成检测；其模块化设计可适配不同地区的法规要求——例如对需要富集的检测项目，提供灵活的合规解决方案。这项突破为大麻产品的微生物安全管控提供了高效精准的分子检测工具。