肌成纤维细胞在肝细胞癌微血管侵袭中的作用机制及CAMK2N1的预后价值研究

这篇研究通过单细胞RNA测序（scRNA-seq）揭示了肝细胞癌（HCC）微血管侵袭（MVI）中肌成纤维细胞（MFs）的关键作用，发现MF2亚群通过血管生成和细胞迁移通路促进MVI形成，并鉴定CAMK2N1为潜在预后标志物。研究为HCC的精准治疗提供了新靶点。

　　

引言

肝细胞癌（HCC）是全球癌症相关死亡的主要原因之一，其发生与肝炎病毒感染、脂肪肝等慢性肝病密切相关。微血管侵袭（MVI）是HCC的重要病理特征，与患者预后不良显著相关，但其形成机制尚不明确。近年来，抗血管生成疗法如索拉非尼虽广泛应用，但耐药性问题突出，亟需探索MVI的细胞和分子机制。

材料与方法

研究整合了公共数据库中的单细胞RNA测序（scRNA-seq）和RNA-seq数据，利用Seurat进行细胞聚类和注释，通过DAVID、CellChat和Monocle 2分别完成功能富集分析、细胞间通讯分析和伪时间轨迹分析。体外实验通过CCK-8、划痕实验和Transwell实验验证关键基因CAMK2N1对HCC细胞增殖、迁移和侵袭的影响。

结果

细胞异质性分析

在MVI阳性和阴性HCC患者中，共鉴定出8种主要细胞类型，包括肌成纤维细胞（MFs）、肝细胞、增殖性肝细胞等。MFs在MVI阳性患者中比例显著升高，并进一步分为5个亚群，其中MF2和MF5与MVI密切相关。

MF2亚群的特征

MF2高表达血管生成关键基因（如AGTR1、CYGB），功能富集显示其参与细胞迁移、信号传导和血管生成。伪时间轨迹分析表明，MVI阳性患者的MF2细胞聚集于分化终点，且与血管生成活性正相关。

细胞间通讯网络

MF2与肝细胞的交互通过直接接触（如JAG1-NOTCH3）和分泌型配体-受体对（如TGFB2-TGFBR1/2）介导，这些通路可能调控肿瘤微环境（TME）中的血管生成和细胞外基质重塑。

预后标志物鉴定

从MF2标志基因中筛选出CAMK2N1，其在TCGA队列中高表达与晚期M分期和不良预后相关。体外实验证实，敲低CAMK2N1显著增强HCC细胞的增殖、迁移和侵袭能力，提示其抑癌作用。

讨论

研究首次系统解析了MFs在MVI中的促血管生成作用，揭示了MF2通过多通路交互驱动MVI的机制。CAMK2N1作为MF2的特异性标志物，不仅为HCC预后预测提供新指标，其抑癌功能的验证也为靶向治疗开辟了思路。局限性包括样本量较小和未涵盖其他TME细胞的协同作用，未来需结合空间转录组技术深入探索。

结论

本研究阐明了MFs促进HCC微血管侵袭的细胞和分子机制，并确立CAMK2N1为潜在预后标志物，为HCC的精准诊疗提供了理论依据。