EGFR/TP53共突变非小细胞肺癌的免疫逃逸与治疗抵抗机制解析及靶向-免疫联合治疗新策略

这篇研究通过单细胞RNA测序技术，系统解析了EGFR/TP53共突变非小细胞肺癌(NSCLC)中恶性上皮细胞亚群(C1_EGFR+和C2_STAT1+)与肿瘤微环境(TME)的互作机制，揭示了STAT1/ETS1转录调控网络通过MDK-(ITGA4+ITGB1)、MIF-(CD74+CXCR4)和TGF-β信号通路诱导CD8+ T细胞耗竭的分子机制，为克服靶向治疗(TKIs)和免疫治疗(ICIs)耐药提供了新靶点。

　　

EGFR/TP53共突变非小细胞肺癌的免疫逃逸与治疗抵抗机制

背景：

尽管精准靶向治疗和酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)显著改善了非小细胞肺癌(NSCLC)患者的预后，但伴随TP53突变的EGFR突变型NSCLC患者常出现耐药和不良临床结局。本研究利用单细胞RNA测序技术，旨在解析这一侵袭性亚型的分子机制。

材料与方法：

研究纳入40例NSCLC患者的福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)肿瘤样本，采用23基因panel进行靶向测序。筛选出4例EGFR/TP53共突变样本进行10x Genomics单细胞转录组分析，并与11例正常肺组织数据整合，最终纳入61,533个细胞进行下游分析。

结果：

恶性上皮细胞亚群特征分析：

通过拷贝数变异(CNV)分析鉴定出两个主要恶性上皮亚群：C1_EGFR⁺亚群富集细胞骨架重塑、细胞连接等增殖侵袭相关通路；C2_STAT1⁺亚群则激活免疫调节和细胞粘附通路，呈现高度免疫抑制和多药耐药表型。轨迹分析显示C2_STAT1⁺由C1_EGFR⁺演化而来，伴随IL6ST、STAT1等免疫调节因子上调。

T细胞耗竭机制：

肿瘤组织中CD8⁺毒性T细胞(CD8T_GNLY⁺)比例显著降低，且呈现耗竭表型(LAG3、PDCD1上调)。发育轨迹显示随着肿瘤进展，毒性标志物(GZMB、GNLY)逐渐减弱，耗竭标志物持续升高。临床数据分析证实耗竭标志物高表达与患者不良预后相关。

细胞互作网络：

C2_STAT1⁺细胞通过三条关键通路诱导T细胞耗竭：

1. 1.

   MDK-(ITGA4+ITGB1)轴促进免疫抑制性微环境

2. 2.

   MIF-(CD74+CXCR4)轴抑制先天免疫

3. 3.

   TGF-β信号直接抑制CD8⁺ T细胞功能

   转录因子分析揭示STAT1/ETS1模块共同调控这些免疫抑制因子和耐药基因(ERBB2、JAK2等)的表达。

CAFs的调控作用：

肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)中，抗原呈递型CAFs(apCAFs: Fib_CD74⁺)通过CCL5-CCR4轴大量招募调节性T细胞(Tregs)，并与SPP1-CD44、THBS2-CD47等信号协同，形成抑制CD8⁺ T细胞功能的"化学屏障"。

讨论与结论：

该研究首次构建了STAT1/ETS1为核心的转录调控模块，系统驱动EGFR/TP53共突变NSCLC的双重表型形成。该网络不仅通过多通路诱导T细胞耗竭，还调控关键耐药基因表达。靶向STAT1/ETS1轴联合EGFR-TKIs或免疫检查点抑制剂，有望突破当前治疗瓶颈。未来需开发特异性抑制剂，并探索低剂量STAT1/ETS1抑制联合免疫治疗的策略。