单细胞测序解析子宫平滑肌肉瘤肿瘤微环境特征与免疫抑制网络

这篇综述通过单细胞RNA测序（scRNA-seq）首次绘制了子宫平滑肌肉瘤（ULSA）的肿瘤微环境（TME）图谱，揭示了以耗竭性CD8+T细胞、M2型巨噬细胞和N2型中性粒细胞为主导的免疫抑制特征，并鉴定出转移相关细胞亚群（U11-EDARADD）及关键通路（TGF-β/MIF信号轴），为开发联合免疫治疗策略提供了新靶点。

　　

3 Results

3.1 临床病例特征

研究基于一例50岁子宫平滑肌肉瘤（ULSA）患者的多次复发转移病灶（盆腔、直肠、腹膜、膀胱）及5例正常子宫肌层对照样本，通过单细胞测序解析肿瘤异质性。该患者术后4年出现结肠转移，9个月后发生腹壁和膀胱转移，拒绝辅助治疗，呈现典型ULSA侵袭性病程。

3.2 单细胞图谱揭示ULSA细胞组成

50,818个高质量单细胞转录组分析鉴定出8大细胞群：T细胞（CD3D/CD3E）、NK细胞（NKG7）、B细胞（MS4A1）、中性粒细胞（S100A8）、内皮细胞（CLDN5）、单核/巨噬细胞（CD14/CD68）及平滑肌衍生细胞（ACTA2）。转移灶中中性粒细胞显著扩增，腹壁转移以平滑肌衍生细胞为主（>80%），与病理染色一致。

3.3 侵袭性肿瘤亚群U11-EDARADD

通过拷贝数变异（CNV）分析区分恶性细胞，发现转移灶特异性亚群U11-EDARADD（1,182个细胞），高表达转移相关基因EDARADD（TNF受体家族）和促癌因子EREG/SLC16A10。功能富集显示该亚群激活TGF-β、EMT和TNF-α/NF-κB通路，TCGA生存分析证实EDARADD与CLDN10高表达患者预后更差。

3.4 中性粒细胞的发育轨迹与N2极化

4,535个中性粒细胞分为12个亚群，伪时序分析揭示从幼稚态（N10-EDARADD/N11-XKR4）向成熟态（N3-SH3RF2/N8-IFNLR1）的分化路径。N2型（CD15⁺EDARADD⁺）富集于转移灶，多色免疫荧光（mpIF）显示其在腹壁转移中形成细胞簇，与不良预后相关。

3.5 内皮细胞的促血管生成特征

12个内皮细胞亚群中，E2-TMIGD2和E9-METTL7B高表达促血管和转移相关基因。终末状态细胞（E1/E10/E11）显著富集TGF-β和血管生成通路，TCGA数据提示TMIGD2/KRT81高表达者生存期缩短。

3.6 T/B细胞的免疫耗竭格局

CD8⁺T细胞沿伪时序呈现从初始态（CCR7⁺MAL⁺）向耗竭态（LAG3⁺HAVCR2⁺）的转化。B细胞分析发现MIF-(CD74+CD44)介导的T-B细胞互作可能促进免疫逃逸。

3.7 髓系细胞的M2极化倾向

2,401个髓系细胞中，M2型巨噬细胞（CD163⁺FTH1⁺TIMP1⁺）占主导，伪时序显示单核细胞向M2表型分化。细胞互作网络提示CXCL8-ACKR1和ICAM1-(ITGAV+ITGB2)信号驱动促肿瘤微环境形成。

4 Discussion

研究首次系统描绘了ULSA的免疫抑制微环境：耗竭性T细胞、M2巨噬细胞和N2中性粒细胞构成“免疫荒漠”，而U11-EDARADD亚群和MIF/CD74信号轴可能成为联合治疗靶点。局限性包括单病例样本和伪时序模型的线性假设，未来需扩大队列验证EDARADD的促转移机制。

5 Conclusion

该单细胞图谱为ULSA的精准治疗奠定基础，靶向EDARADD、CLDN10等分子或逆转免疫抑制微环境，改善患者预后。