2021-2023年湖州市腹泻病例中副溶血弧菌的流行病学特征、毒力基因及耐药性分析

本研究系统分析了湖州市6家医院2021-2023年6,404例腹泻患者中分离的250株副溶血弧菌（V. parahaemolyticus），揭示了O10:K4（93.2%含tdh基因）为优势血清型，发现95.56%菌株对头孢唑林（CFZ）耐药等关键特征。通过cgMLST（核心基因组多位点序列分型）构建最小生成树，首次发现O4:KUT临床分离株分化为ST3和ST2516两个进化差异显著的克隆群，为食源性疾病防控提供了重要科学依据。

　　

引言

副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）作为革兰阴性嗜盐杆菌，已成为全球海鲜相关感染的主要病原体。在浙江省食源性疾病暴发事件中，该菌占比高达58.4%。湖州市作为典型水产品消费区，其流行病学特征及耐药现状亟待阐明。

材料与方法

研究收集了湖州市六家监测医院2021-2023年的6,404份腹泻标本（排便≥3次/天且性状异常），通过血清凝集试验（11种O抗原和65种K抗原）鉴定血清型。采用三重实时荧光PCR检测tlh/tdh/trh毒力基因，参照CLSI M100-S23标准进行13种抗生素的微量肉汤稀释法药敏试验。对121株临床分离株进行cgMLST分析，使用chewBBACA套件构建最小生成树。

结果

流行病学特征

• 阳性率：总检出率3.90%（250/6,404），2021年最高达4.60%

• 人群分布：45-64岁组感染率最高（6.74%），无性别差异（p>0.05）

• 季节特征：夏季阳性率6.69%（143/2,136），冬季仅0.091%

血清型与毒力基因

• 血清型：鉴定出9个O血清群和28种血清型，O10:K4占60%（150/250）

• 毒力基因：93.2%菌株携带tdh基因，4.0%含trh基因，1.2%双阳性

耐药性分析

• 头孢唑林耐药率高达95.56%（172/180）

• 对氨苄西林（AMP）耐药率12.78%

• 全部菌株对头孢呋辛（CFX）、亚胺培南（IPM）等6种抗生素敏感

分子特征

cgMLST分析显示：

• O4:KUT菌株分化为ST3和ST2516两个遗传距离较远的克隆群

• O10:K4与O3:K6血清型存在进化亲缘性

• ST3为优势流行克隆，与亚洲和美洲流行株一致

讨论

研究发现湖州市副溶血弧菌流行特征呈现"三高"现象：夏季高发、中青年高感染率、O10:K4高占比。值得注意的是，传统优势血清型O3:K6已被O10:K4取代，后者可能通过获得毒力基因（如tdh）增强致病性。95.56%的CFZ耐药率警示临床需避免使用一代头孢治疗。ST2516型O4:KUT菌株的发现，提示需要关注新发克隆的传播风险。

研究创新性地采用cgMLST技术解析菌株进化关系，发现O10:K4可能起源于O3:K6的基因重组事件。尽管不含tdh/trh基因的菌株仍具致病性，这可能与T3SS（III型分泌系统）和T6SS（VI型分泌系统）等毒力因子相关。建议加强水产品冷链管理，针对夏季夜市餐饮实施重点监管。

该成果为长三角地区食源性疾病防控提供了重要基线数据，其揭示的耐药谱变化对临床用药具有直接指导价值。未来需开展跨区域溯源研究，监测ST2516克隆的流行潜力。