中国西南地区儿童Alport综合征的分子诊断：靶向外显子测序揭示新型COL4A3/4/5变异

这篇研究通过靶向外显子测序（TES）对中国西南地区20例临床疑似Alport综合征（AS）患儿进行分子诊断，鉴定出21个COL4A3/4/5基因变异（含10个新发变异），其中76.2%为致病/可能致病性变异。研究证实TES可作为AS早期诊断的高效工具，为遗传咨询及精准治疗提供依据，并拓展了AS相关基因的突变谱。

背景

Alport综合征（AS）是一种由IV型胶原基底膜缺陷引发的遗传性疾病，以血尿、进行性肾功能衰竭为核心表现，常伴高频感音神经性耳聋及眼部异常。其致病基因包括COL4A3、COL4A4（常染色体遗传）和COL4A5（X连锁遗传），三者编码的α3/α4/α5链构成肾小球基底膜（GBM）的关键支架结构。AS的临床异质性高，传统诊断依赖肾活检和免疫荧光染色，但存在侵入性和漏诊风险。

方法

研究纳入20例西南地区疑似AS患儿（中位年龄6.5岁），通过靶向捕获504个肾病相关基因（含COL4A3/4/5）进行外显子测序。采用Illumina平台生成150bp双端读长，数据经BWA-MEM比对和GATK变异检测，严格遵循ACMG标准进行变异分类。新发变异通过Sanger测序验证家系共分离。

结果

共检出21个变异（10个新发），包括错义（47.6%）、移码（23.8%）和剪接变异（9.5%）。76.2%变异被判定为致病/可能致病，其中COL4A5占比最高（6/10新变异）。表型分析显示所有患儿存在血尿，65%伴蛋白尿，仅5%出现听力或视力异常。值得注意的是，男性X连锁AS患者临床表现更严重，符合IV型胶原缺陷的剂量效应理论。

讨论

研究揭示了AS基因型-表型关联的复杂性：COL4A5截短变异多导致重型肾病，而错义变异表型异质性更大。与HGMD数据库对比，新发现的剪接变异c.1033-1G>C和移码变异c.1951_1954dup进一步丰富了东亚人群AS突变谱。靶向测序相比全外显子测序（WES）在成本效益和数据解析效率上更具优势，尤其适合多外显子基因的临床检测。

结论

该研究证实靶向外显子测序是儿童AS分子诊断的可靠方案，为早期干预和家系遗传咨询提供关键依据。未来需扩大样本验证新变异的致病机制，并探索基因治疗在AS中的应用潜力。