橡胶树叶斑病病原菌Truncatella angustata的首次鉴定及其生防菌Trichoderma spp.的体外抑制研究

本研究首次报道了印度尼西亚橡胶树叶斑病病原菌Truncatella angustata的分离鉴定，并通过体外实验证实Trichoderma asperellum和T. koningiopsis对其生长具有显著抑制效果（抑制率分别为76.61%和59.65%），为橡胶树病害生物防治提供了新策略。

　　

橡胶树（Hevea brasilliensis）作为全球重要的经济作物，其天然橡胶产量占世界总量的27.41%。然而叶斑病导致东南亚地区橡胶减产高达50%，其中由 pestalotioid 真菌（一类形态相似但遗传差异显著的病原菌）引起的病害因难以准确鉴定而防治困难。传统病原菌如 Pestalotiopsis microspora 和 Corynespora cassiicola 已被广泛研究，但近期在印度尼西亚Jambi省橡胶种植园发现的叶斑病样本中，研究人员意外分离到一种罕见病原菌——这为病害防控带来了新挑战。

为明确病原菌种类并开发绿色防控方案，来自印尼布拉维贾亚大学的 Tristan B. Alexander 团队在《Journal of Natural Pesticide Research》发表研究，首次鉴定出 pestalotioid 真菌 Truncatella angustata 是当地橡胶树叶斑病的新病原，并发现土壤来源的 Trichoderma asperellum 对其具有76.61%的抑制率。该研究通过形态学观察、18S rDNA分子鉴定和双培养实验，系统揭示了 Trichoderma 菌株通过菌丝缠绕（hyphal coiling）和营养竞争发挥生防作用的机制。

关键技术方法包括：从患病橡胶叶分离纯化病原菌；采用NS1/NS8引物扩增18S rDNA进行分子鉴定；通过双培养法测定 Trichoderma 对病原菌的抑制率；结合光学显微镜和场发射扫描电镜（FASEM）观察菌丝互作。

研究结果：

1. 1.

   真菌鉴定：病原菌P1经形态学（具4个隔膜的梭形分生孢子）和分子鉴定（与T. angustata相似度99.82%）确认为 Truncatella angustata，为印尼首次报道。生防菌TB鉴定为 Trichoderma asperellum（相似度99.89%），TA为 T. koningiopsis（98.98%）。

2. 2.

   致病性测试：接种10⁶孢子/mL悬浮液后，T. angustata 在健康橡胶叶上引发黄色斑点（7天后），但未导致落叶，符合柯赫氏法则的致病性验证。

3. 3.

   抑制效果：T. asperellum（TB）8天内将病原菌生长直径限制在2.28 cm，抑制率达76.61%（"极高效"）；T. koningiopsis（TA）抑制率为59.65%（"高效"）。

4. 4.

   作用机制：FASEM显示T. asperellum 通过菌丝缠绕直接寄生病原菌（8 DPI时可见明显缠绕），而T. koningiopsis 主要依赖抗生素作用形成抑制带。

讨论与意义：该研究突破性地将 T. angustata 与橡胶叶斑病关联，拓展了对 pestalotioid 真菌宿主范围的认识。生防菌 T. asperellum 展现的强寄生能力（76.61%抑制率）为田间应用提供候选菌株，其快速定殖特性（3天覆盖培养基）与菌丝缠绕机制区别于 T. koningiopsis 的化学抑制模式，暗示不同 Trichoderma 菌株可组合使用以实现多靶点防控。研究者建议后续开展田间试验，验证 T. asperellum 对橡胶树实际保护效果，并探索其分泌的几丁质酶（chitinase）等抗真菌物质的具体作用。这项成果为东南亚橡胶主产区的病害治理提供了新的生物防治思路。